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大腸菌の細胞分裂に関与する遺伝子群の構造と機能の解析

大肠杆菌细胞分裂相关基因的结构和功能分析

基本信息

批准号：
02237205
负责人：
西村昭子
金额：
$ 1.28万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至 1991
项目状态：
已结题

项目摘要

当研究は、大腸菌の細胞分裂調節の機構を解明する為に、先ずこの機構を構成する全遺伝子群を系統的に同定し、個々の遺伝子の構造と機能、互の連関を網羅的に解析すると共に、一方ではまた細胞の増殖過程に整合性を与える機構特にDNA複製の終了から細胞分裂の開始に到る機構に重点を置いて、細胞分裂機構のkey反応を追究するものである。今年度は以下の成果をえた。1.DNA複製終結点(<ter>___ー)近傍に座位する細胞分裂遺伝子(<fts>___ー)群の解析を行った結果、堀内(基生研)らにより解析された複製終結点terC_1とterC_3の間の領域に座位する<fts>___ー遺伝子は少なかったが時計方向複製の終結点terC_3ーterC_2領域及び反時計方向複製の終結点terC_1ーterC_4領域には結胞分裂遺伝子群が集中的に座位していた。2.細胞分裂の温度感受性欠損株<fts349>___ーは95分に座位するにも拘らず、この欠損は異なる4ケ所(4分 10分 28分 59分)に座位するDNA分子種によって抑制されることが判明した。こられ4種はDNAの既知のDNAとは異る重複配列を持つ。現在この重複配列を含む更に広範囲の領域の塩基配列の解析を行い機能と構造の関連を追究している。3.昨年実証した「細胞分裂の頻度を決定する遺伝子<cfcA>___ー」の構造解析を開始した。現在この遺伝子欠損<cfcA1>___ーを抑制するDNA分子種(遺伝子座位79.2分)3.6Kbとそのdeletion mutant の塩基配列の解析により機能と構造の関連を追究している。4.昨年多数の温度感受性変異株コレクションとpLCーplasmidコレクションとの相補性テストにより、細胞分裂に関与する全<fts>___ー遺伝子群の染色体地図を作成した。今年度はこのpLCーplasmidと小原(遺伝研)の連鎖clone bankとのplaque hybridizationにより、<fts>___ー遺伝子群が座位するDNA分子種の解析を完了した。今後順次これらのDNA分子の構造解析を行う。

When studying the mechanism of regulation of cell division in E. coli, we should focus on the mechanism of DNA replication termination and initiation of cell division, especially on the mechanism of DNA replication termination and initiation of cell division. The key to cell division is to investigate. This year's results are as follows. 1. The analysis of the cluster of cell <ter>division vectors near the locus of <fts>DNA replication endpoint (__<fts>_ 2. The <fts349>results showed that the DNA molecular species of the 95-minute locus was inhibited and the 4-minute locus was inhibited by the temperature sensitive strain. 4 kinds of DNA are known to be different from each other. Now the repeated arrangement includes the analysis of the basic arrangement in the domain of change, function and structure. 3. The structural analysis of cell division frequency determination began last <cfcA>year. Now, <cfcA1>the deletion mutant DNA molecular species (79.2 points at gene locus)3.6Kb and the deletion mutant gene base alignment analysis, functional and structural relationships were investigated. 4. Most of the temperature-sensitive mutants were constructed last year with complementary chromosome patterns, cell division patterns, and complete chromosome subsets<fts>. This year, we have completed the analysis of DNA molecular species in the clone bank and plaque hybridization of pLC-plasmid <fts>and Ohara. In the future, the structural analysis of DNA molecules will be carried out successively.