大腸菌の全プロテァ-ゼの構造の機能

所有大肠杆菌蛋白酶的结构和功能

• 批准号: 02237201
• 负责人: 市原 茂幸
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02237201/
• 关键词: Escherichia coli; profease; membrane

大腸菌には30種以上のプロテア-ゼが存在するが、その中で必須であるのはわずか3種類である。これは、プロテア-ゼが相互にその複雑な作用を補あっていることを示している。一細胞におけるプロテア-ゼの相互的な役割を明らかにすることを目的とし、存在する全てのプロテア-ゼ遺伝子をクロ-ニングして一次構造を決定すること、および、その欠失変異株を得ることを試みている。本研究は地道な積み重ねが必要であり、1年間で具体的な成果を挙げることはできない。計画に述べた具体的な作業がどの程度進行しているかを報告する。(1)既知プロテア-ゼ遺伝子のクロ-ニングと一次構造の解析ーーーこれまで既知プロテア-ゼの5クロ-ンを取得した。その中でapeAについてはじめて全DNA構造を明らかにした。(2)未知プロテア-ゼの検索ーーー500株のSDS感受性形質伝換株からなるバンクを作製した。バンク株の活性を種々の基質を用いて測定しているが現在のところ新してプロテア-ゼは見いだされていない。(3)欠失変異株の作製ーーークロ-ニングできた5種のうち、細胞表層に存在する4種のプロテア-ゼについてその欠失変異株を作製した。いずれも単独では生育になんら影響を与えなかった。4種中3種までの同時欠失変異も生育になんら影響を与えなかった。現在4種の組合せ変異株の作製を試みている。本研究過程において、上記(2)のバンク中SDS感受性の顕緒なクロ-ンについては、機能を明らかにする目的で検討を行った。その結果、94.3minの<kil>___ー(溶菌リポタンパク質)および、35.0minの<aceP>___ー(acetete permease)を新しく同定し、それらのDNA一次構造等を明かにした。

There are more than 30 types of coliforms in the のプロテア-ゼがするが, and there are 3 types of coliforms that are necessary.これは, プロテア-ゼが mutual にそのFU雑なeffect を complement あっていることをshow している. One cell におけるプロテア-ゼのmutual no service cut を明らかにすることをpurpose とし, existence する全てのプロテア-ゼ伝子をクロ-ニングしてOne time structure をdetermination すること, および, そのowed loss 変different strains を got ることをtrial みている. This study is an authentic and comprehensive study of the necessary and specific results over a period of one year. The plan is described, the specific work is carried out, and the level of progress is reported. (1) Analysis of the structure of the known プロテア-ゼ伝子のクロ-ニングとone time structure.その中でapeAについてはじめてFull DNA structureを明らかにした. (2) Unknown プロテア-ゼの検SO ーーー 500 strains of SDS-receptive morphological changes of strains made by からなるバンクを.バンク strain's active を species 々の matrix を is measured by いて しているがNow のところ新してプロテア-ゼは见いだされていない. (3) The production of different strains of the same strain, the cell surface There are 4 kinds of のプロテア-ゼについてその无変different strains of した.いずれも単では生になんら Impact を and えなかった. 3 of the 4 types of までの have both the になんらinfluence and the えなかった that are different from each other. Now, 4 kinds of combinations are made from different strains of different strains, and we are trying them out. The purpose of this research process is the sensitivity of SDS in the above mentioned (2) SDS sensitivity and functionality, and the purpose of the study.そのRESULT、94.3minの<kil>___ー(lysis bacterium リポタンパク性)および、35.0minの<aceP>___ー(acetete permease)を新しく同定し、それらのDNA primary structure and so onを明かにした.

项目成果

S.Ichihara and I.Kawamura: "Molecular Cloning,Sequencing and Characterizations of Two Small Membrane Lipoproteins in <Escherichia>___ー <coli>___ー"

S.Ichihara 和 I.Kawamura：“<埃希氏菌>_____ <大肠杆菌>___— 中两种小膜脂蛋白的分子克隆、测序和表征”

S.Ichihara,K.Hosono and T.Mizuno: "Identification and Characterizations of the Acetate Permease in <Escherichia>___ー <coli>___ー"

S.Ichihara、K.Hosono 和 T.Mizuno：“<埃希氏菌>___— <大肠杆菌>___— 中乙酸渗透酶的鉴定和表征”

S.Ichihara,Y.Matsubara and S.Mizushima: "Protease I Localizedin the Periplasm and Protease V in the Membrane are Encoded by the Same Gene,<apeA>___ー,in <Escherichia>___ー <coli>___ー"

S. Ichihara、Y. Matsubara 和 S. Mizushima：“位于周质中的蛋白酶 I 和膜中的蛋白酶 V 由同一基因编码，<apeA>___，位于 <埃希氏菌属>_____ <大肠杆菌>___ - ”