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Merrifield型多孔質ガラス担体の蛋白工学への利用

Merrifield型多孔玻璃载体在蛋白质工程中的应用

基本信息

批准号：
03205102
负责人：
今田清久
金额：
$ 0.51万
依托单位：
University of Miyazaki
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ぶたすい臓リパ-ゼ、ヒスチヂンデカルボキシラ-ゼ(IDC)および起源のことなる2種のフルクトフラノシダ-ゼの固定化を行い、良好な結果をえた。最後の2例は機能性甘味料の製造にかかわるものであり、1か月をこえる試験の後にも当初と全く変わらない酵素活性を示した。リパ-ゼについては有機溶媒中で脂肪酸のエステルを合成するのに有効であることが明らかとなった。HDCについては芳香環をジアゾ化する方法により活性のある固定化酵素を得た。セルラ-ゼ固定化も可能で可溶性のCMCやセロビオ-スを分解する活性ばかりでなくグルコ-スからセロオリゴ糖を合成する反応も確認出来た。各種のアミノアルキル基を結合させたアミノ化多孔質ガラスをBO1班の用に供しワクチンの中から細菌のエンドトキシンリポ多糖を取り除く実験に試用していただいた。これらの研究とは別に、土壌より採取したバシルス属菌のカルボキシメチルセルロ-ス(CMC)分解酵素の遺伝子をクロ-ン化しこれによって形質転換した大腸菌が生産する酵素と野生株の生産する酵素を粗精製し、更に市販のセルラ-ゼ酵素とも比較しながら、各種の基質に対する特性や固定化の有効性を調査した。我々が主として使用している多孔質ガラスは骨格にアルミニウムを含むものであるが、固定化酵素の担体として市販の多孔体と同等またはそれ以上の性能をもっている。アフィニティ-クロマトグラフィ-用担体としては、通常用いられる高分子系の球状担体に較べ、1g当たりのアミノ基量が少ないが、固体表面の有効な官能基の密度としては有効なものが多い。現在BO1班と共同で進めている研究がこのことについての指針となろう。クロ-ン化したものと野生株のCMCア-ゼを用い、グルコ-スからオリゴ糖を得ることが出来たので、これについても、固定化酵素を用いたバイオリアクタ-へと研究を進めたい。

This is the first time that two kinds of IDC have been immobilized, and the results are good. In the end, 2 cases of functional sweeteners were made, and the enzyme activity of the whole body was detected after 1 month of treatment. In the organic solvent, the fatty acid, the synthesis, the synthesis. HDC was used to determine the activity of the immobilized enzyme. "immobilization" may be soluble "CMC", "decomposition", "activity", "sugar synthesis", "reverse", "confirm". All kinds of basic materials are combined to prepare porous carbon dioxide (BO1), which can be used for the extraction of polysaccharides from bacteria, bacteria, and polysaccharides. In this study, the bacteria were isolated from the genus of bacteria, the bacteria were isolated from the genus of bacteria, and the enzymes were digested in the form of enzymes (CMC). The results showed that the wild strains of wild strains were isolated from wild strains of bacteria, crude and refined strains of enzymes. The immobilization of the properties of all kinds of basic systems has a significant effect on them. We use porous materials such as porous materials, bone cells, bone cells, immobilized enzymes, immobilized enzymes, porous materials, and so on. The carrier is used as the carrier, the polymer system as the spherical carrier, the weight as the base, the density of the functional group as the solid surface, the density of the functional group, the density of the solid surface. At present, the BO1 class is working together to conduct a study. The wild strains of CMC were used in this study. The sugar was extracted from the wild plants and the immobilized enzymes were studied.