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集積型微小光プロ-ブによる心筋細胞活動電位とその調整機構に関する研究

集成显微光学探针研究心肌细胞动作电位及其调节机制

基本信息

批准号：
03253205
负责人：
宮崎保光
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Toyohashi University of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.心筋細胞染色法の確立リンガ-溶液を溶媒とした膜電位感受性色素溶液を用い、最適な染色溶液の濃度および染色時間の検討を行った。このため染色前後の心筋細胞の吸収スペクトルおよび染色後の蛍光放射スペクトルを計測し、色素の染色による分光特性の変化を明らかにした。2.コイ心筋活動電位の光学的測定心筋細胞を膜電位感受性色素を含むリンガ-溶液中で染色し、自発性興奮により生じた活動電位を光学的に計測した。蛍光強度をストレ-ジオシロスコ-プで記録し、その経時的変化をコンピュ-タ-に取り込みデ-タ処理を行っている。オキサジン系、オキソノ-ル系、メロシアニン系などの膜電位感受性色素において、種々のレ-ザ光源で励起されたときの微弱な蛍光をフォトカウント法で測定するための基礎的な技術を確立した。3.ビ-ム走査式型多数点同時経測システムの検討音響光学効果を用いたビ-ム走査式型多数点同時計測システムを作製し計測を行った。これにより、CCD素子を用いるサブミクロンオ-ダの空間分解を有するレ-ザプロ-ビングシステム開発の基礎的なデ-タを得た。4.膜電位感受性色素の膜電位感受性機構の検討膜電位感受性色素溶液に外部電界を加え、その時の吸収、蛍光放射スペクトルを測定た。これにより、色素の膜電位感受性機構の解明の基礎的デ-タを得た。5.光学的測定と電気生理学的測定との比較検討顕微鏡を用いたシステムで光学的に測定した活動電位の時間応答波形の立ち上がり、立ち下がり特性とその電気生理学的測定結果との比較を行った。種々の色素蛍光信号の応答特性の測定により、筋小胞体への興奮伝導の機構の知見を得た。

1. The establishment of the method for staining cardiac muscle cells: the solvent, the membrane potential-sensitive pigment solution, the optimum staining solution concentration, and the staining time were discussed. Before and after staining, the absorbance of cardiac muscle cells was measured, and after staining, the spectral characteristics of pigment were measured. 2. Optical measurement of cardiac muscle activity potential. Cardiac muscle cell membrane potential sensitivity pigment. The intensity of the light is measured by the light intensity of the light source. The basic technology for the measurement of membrane potential-sensitive pigments such as the Okeysan system, Okeyso-Al system, and Merosyn system using weak fluorescent light from various light sources has been established. 3. Multiple-point simultaneous measurement system for multiple-point simultaneous measurement system The CCD element is used in the spatial decomposition of the CCD element. The CCD element is used in the spatial decomposition of the CCD element. 4. Measurement of membrane potential-sensitive pigment membrane potential-sensitive mechanism external electric field, absorption time and emission time The membrane potential-sensitive mechanism of the pigment was studied. 5. Comparison of optical measurement and electrophysiological measurement results with microscopes for optical measurement of time response waveforms and electrophysiological characteristics The determination of the response characteristics of pigment fluorescence signals in seed cells and the mechanism of excitation conduction in muscle cells were obtained.