植物における熱ストレス応答の分子遺伝学的解析

植物热应激反应的分子遗传学分析

• 批准号: 06261205
• 负责人: 米田 好文
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06261205/
• 关键词: シロイヌナズナ; HSP90ファミリー遺伝子; 発現調節因子; レポーター遺伝子; HSP81-1遺伝子; HSP81-2遺伝子

シロイヌナズナHSP90ファミリー遺伝子の機能を解析するため、まず発現調節因子を検索した。一般にSouth-Western法を用いて研究されるが、ここではよりin vivoを再現する系として酵母細胞中での相互作用を用いた。1)HSP81プロモーターをレポーター遺伝子に結合させ、酵母細胞中に導入して遺伝子発現を調べた。その結果、常温でもHSP81-1遺伝子が高い活性を示した。2)常温での発現が酵母細胞中で低いHSP81-2遺伝子を用いて、転写上昇を引き起こすシロイヌナズナcDNA断片を検索した。その結果、200,000クローンから20クローンを選択した。3)まず、8クローンを詳細に発現解析した。HSP81-2遺伝子と同様な組織特異性を示したクローン♯108、♯101とロゼット葉で発現するクローン♯102、♯105を同定した。4)これらのクローンの塩基配列を決定した。クローン♯105はレセプター型のプロテインキナーゼと相同性もう示した。5)活性の更なる上昇を同定するために、レポーター遺伝子をヒスチジン合成酵素遺伝子に換えたプラスミドを用いても検索し始めた。6)2-hybrid systemで相互作用が同定できるかを検討した。

HSP90 is the most important factor in the analysis of gene function. In general, South-Western methods are used to study interactions in yeast cells. 1) HSP81 gene binding and gene expression in yeast cells The results showed that HSP81-1 gene had high activity at room temperature. 2)The expression of HSP81 -2 gene in yeast cells at room temperature was studied. The result is 200,000 krones and 20 krones. 3) Detailed analysis of the display, 8. HSP81 -2 gene and similar tissue-specific expression were identified by HSP108, HSP101 and HSP105. 4) The basic structure of the system is determined. 105. The same is true of the original design. 5)The activity of the enzyme is increased and the activity of the enzyme is increased. 6)2-Hybrid system interaction is constant.