固体高分解能NMRによる原子間距離の精密測定に基づく高次構造解析

基于使用固态高分辨率核磁共振精确测量原子间距离的高阶结构分析

• 批准号: 06276215
• 负责人: 斉藤 肇
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Himeji Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06276215/
• 关键词: 固体高分解能NMR; 原子間距離; 高次構造解析; 生理活性ペプチド; バクテリオロドプシン

われわれは第一に、情報伝達分子としての生理活性ペプチドについて、固体における精密な原子間距離情報に基づいた三次元構造の新規構築手法の確立をはかった。さらに、受容体モデルとしてのバクテリオロドプシンについて、蛋白質部位の構造変化のプローブとしての^<13>CNMRスペクトル法の確立のための、NMR信号の位置特異的な帰属および距離測定データとの結合の可能性についても検討を行った。生理活性ペプチド 二重標識ロイシンおよびメチオニンエンケファリンを系統的に合成し、その回転エコー二重共鳴(REDOR)測定により二面体角の決定を行った。水ならびに水-エタノール系からの結晶化により、異なる^<13>CNMRスペクトルを与える結晶標品を得ることができた。^<13>CNMRスペクトルからみた結晶の多様性は、温度変化に伴う可逆的な結晶構造の転換をふくめ、これまでに報告されているX線回折データからによる構造の多様性をしのぎ、距離測定法によるこれらの多様構造のキャラクタリゼーションの必要性を示した。受容体モデル [3-^<13>C]Ala標識バクテリオロドプシン(bR)を培養によって調製し、その^<13>CNMRスペクトルパターンがプロテアーゼ処理の有無によりどのように変化するかを調べた。高出力デカップリングのみのスペクトルにではC末端の有無によってスペクトルが大きく変化するのに対し、CP条件ではその領域が持つ運動性のために信号領域から完全に消滅していることがわかった。さらに、αヘリックス領域にはI型II型の2種類が存在すること、また温度変化によって両者の間に転換が見られることも明かになった。現在、クロモファーとの相互作用あるいは光サイクルによるbRの蛋白質部位の構造変化についても興味ある知見が得られており、より詳細なスペクトル線の帰属に向けて研究を進めている。

For the first time, information transmission molecular physiology activity, solid state, precision interatomic distance information, basic three-dimensional structure and new construction method In addition, the receptor structure, protein <13>structure, and the possibility of binding to NMR signals are discussed. The determination of the dihedral angle in the determination of the physiological activity of the double labeling system is carried out in the synthesis of the double resonance (REDOR). Water is the crystallization of water, and the crystallization of water is the crystallization of water<13>. <13>CNMR shows the necessity of structural diversity in X-ray reflection and distance measurement for crystal diversity and temperature variation accompanied by reversible crystal structure transformation. The receptor [3-^<13>C]Ala logo is selected from the group consisting of the following components: (1) The receptor [3-^ C]Ala logo is selected from the group consisting of the following components: (2) The receptor [3-^ C]Ala logo is selected from the group consisting of the following components: (3) The receptor [3-^C] Ala logo is selected from the group consisting of the following components: (4) The receptor [3-^C] Ala logo is selected from the group consisting of the group consisting <13>of High power, high power, high The two species of type I and type II exist in the field, and the temperature changes in the field. Now, the interaction between the two proteins is going to be studied in detail.