マウス胎仔生殖細胞の分化制御機構に関する研究

小鼠胎儿生殖细胞分化调控机制的研究

• 批准号: 07283222
• 负责人: 中辻 憲夫
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07283222/
• 关键词: 始原生殖細胞; 胎仔生殖細胞; 増殖因子; サイトカインレセプター; EG細胞株; 遺伝子導入; アポトーシス; 雌雄分化

これまでに、マウス胎仔から取り出した始原生殖細胞の体外培養系を確立して、レチノイン酸やBRL細胞の培養上清が増殖促進を行うことや、生殖巣に到着後の生存増殖にとってサイトカインレセプターgp130が重要な機能を果たしていることを見いだした。それとともに、未分化幹細胞に転換して増殖を継続する細胞コロニーがいわゆるEG細胞として出現する条件としてこれまでに知られているbFGF以外に細胞内cAMPレベルやレチノイン酸の関与でも引き起こされることを発見した。また始原生殖細胞の培養下における増殖とその停止が細胞自律的にプログラムされていることを詳細なクローン培養などによって明らかにした。一方、生殖細胞や生殖巣の発生分化に関わる遺伝子機構の解析や生殖細胞の遺伝子操作手法の開発にアプローチするために、培養下で増殖させた胎仔生殖細胞に遺伝子導入を行う方法を検討した結果、10〜20%の生殖細胞での一過性発現を確認できる方法を見いだすとともに、細胞のアポトーシスを抑制することが知られているBcl-XLやAd2E1B19kDa遺伝子の発現が生殖細胞の培養下での死滅を抑制するらしいことを明かにした。また生殖細胞や体細胞が雌雄の性分化を開始するときに、性や時期特異的に発現する遺伝子の検索を開始して候補遺伝子をいくつか見いだした。

こ れ ま で に, マ ウ ス tire tsai か ら take り out し た の primordial germ cells in vitro culture line を establish し て, レ チ ノ イ ン acid や の BRL cells culture supernatant が raised colonization promote を line う こ と や, reproductive 巣 に to の survival rights after the colonization に と っ て サ イ ト カ イ ン レ セ プ タ ー gp130 が important function of な を fruit た し て い る こ と を see い だ し た. そ れ と と も に, undifferentiated stem cells に planning in し て raised colonization を 継 続 す る cells コ ロ ニ ー が い わ ゆ る EG cells と し て in す る conditions と し て こ れ ま で に know ら れ て い る bFGF に intracellular cAMP outside レ ベ ル や レ チ ノ イ ン acid の masato and で も lead き up こ さ れ る こ と を 発 see し た. Beginning ま た の primordial germ cells develop under に お け る raised colonization と そ の stop が cell self-discipline に プ ロ グ ラ ム さ れ て い る こ と を detailed な ク ロ ー ン cultivate な ど に よ っ て Ming ら か に し た. Side, germ cell や reproductive 巣 の 発 raw differentiation に masato わ る heritage 伝 child institutions の parsing や traces of germ cell の 伝 child practices の open 発 に ア プ ロ ー チ す る た め に, cultivating で raised under colonization さ せ た tire seed traces of germ cell に 伝 son import line を う method を beg し 検 た results, 10 ~ 20% の germ cell で の transient 発 を now confirmed で き る method を see い だ す と と も に, cell の ア ポ ト ー シ ス を inhibit す る こ と が know ら れ て い る Bcl - XL や Ad2E1B19kDa posthumous son 伝 の 発 の が reproductive cell culture conditions now で の die out を inhibit す る ら し い こ と を Ming か に し た. ま た や somatic が male and female reproductive cells の sexual differentiation を began す る と き に period, sexual や specific に 発 now す る heritage 伝 son の 検 cable を began し て alternate heritage 伝 son を い く つ か see い だ し た.

项目成果

Koshimizu,U.,Watanabe,M. and Nakatsuji,N.: "Retinoic acid is a potent growth activator of mouse primordial germ cells in vitro." Devel.Biol.168. 683-685 (1995)

小清水，U.，渡边，M.

Koshimizu,U.他: "Functional requirement of gp130-mediated signaling for growth and survival of mouse primordial germ cells in vitro and derivation of embryonic germ(EG)cells." Development. (in press). (1996)

Koshimizu, U. 等人：“小鼠原始生殖细胞体外生长和存活以及胚胎生殖 (EG) 细胞的衍生的 gp130 介导的信号传导的功能要求（正在出版）。”

Kawase,E.,Shirayoshi,Y.,Hashimoto,K.and Nakatsuji,N.: "A combination of buffalo rat liver cell-conditioned medium,forskolin and membrane-boundstem cell factor stimulates rapid proliferation of mouse primordial germ cells in vitro similar to that in vivo."

Kawase,E.、Shirayoshi,Y.、Hashimoto,K. 和 Nakatsuji,N.：“水牛大鼠肝细胞条件培养基、毛喉素和膜结合干细胞因子的组合刺激小鼠原始生殖细胞在体外的快速增殖，类似

Ohkubo, Y., Shirayoshi, Y. and Nakatsuji, N.: "Autonomous regulation of proliferation and growth arrest in mouse primordial germ cells studied by mixed and clonal cultures." Exp. Cell Res.222. 291-297 (1996)

Ohkubo, Y.、Shirayoshi, Y. 和 Nakatsuji, N.：“通过混合和克隆培养物研究小鼠原始生殖细胞增殖和生长停滞的自主调节。”