"体性"多能性幹細胞の分離・精製

“体细胞”多能干细胞的分离和纯化

• 批准号: 14657306
• 负责人: 中辻 憲夫
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657306/
• 关键词: 多能性幹細胞; 肝幹細胞; green fluorescent protein; 骨髄細胞; 分化

本研究では、我々の入手している肝幹細胞、骨髄細胞をもとに、それらに共通して混在していると思われる"体性"多能性幹細胞を同定し、分離・精製することを目的として研究を開始した。我々が胎仔及び成体マウスから分離した肝幹細胞においては(安近ら,Hepatology,2002)(東ら,Hepatology,2003)、その詳細な特性解析の過程で肝幹細胞特異的な未知遺伝子を同定しつつあり、これらの遺伝子をマーカーとして用いることで、我々の獲得している肝幹細胞分画中に、より未分化な細胞が含まれていないかにつき現在検討を進めている。また、肝幹細胞から成熟肝細胞への分化誘導法の検討の過程にて幹細胞の分化誘導に必須と思われる細胞集団の同定・分離を行い(北方ら,Hepatology,2004,in press)、この細胞と肝幹細胞との細胞間相互作用を検討することで肝細胞系に分化誘導する新たな因子の同定、さらには骨髄細胞から肝細胞系へと分化可能な細胞集団の同定・分離法の確立が可能かどうかにつき検討している。この過程で我々は、肝臓中に骨髄細胞由来の星細胞が存在することを解明した(馬場ら,Journal of Hepatology,2004)。さらに、生殖細胞系列などのより未分化な細胞のみに発現することが知られているOct3/4のプロモーター下にgreen fluorescent protein(GFP)発現を示すトランスジェニックマウスを用いることで、現在我々が入手している肝幹細胞や骨髄細胞中からより未分化な細胞分離の検討を行っている。現在までに肝幹細胞中にはGFP陽性細胞は認められないが、骨髄細胞中にはGFP陽性の未分化細胞の存在を示唆する結果が得られており、flow cytometryにおいて幹細胞特性の一つと考えられるSide Population分画との相関関係を検討している。

This study is aimed at identifying, isolating, and refining human pluripotent stem cells. We have fetal and adult liver stem cells.(Anjin,Hepatology,2002)(Dongri,Hepatology,2003), Detailed characterization of liver stem cell-specific unknown genes, identification of undifferentiated liver stem cells, identification of undifferentiated liver stem cells. The process of differentiation induction of stem cells from mature hepatocytes to mature hepatocytes must be considered for the identification and isolation of cell populations.(Northern Japan,Hepatology,2004,in press), identification of novel differentiation inducing factors in liver cell lines, identification of possible differentiation inducing factors in liver cell lines, and identification of possible cell populations by isolation methods. This process is explained in detail by the existence of astrocytes derived from bone marrow cells in the liver and liver (Ma Ba,Journal of Hepatology,2004). In addition, the germ cell line is divided into undifferentiated cells and undifferentiated cells. The expression of green fluorescent protein(GFP) is shown in Oct3/4. The expression of GFP is shown in Oct3/4. The results showed that there were no GFP-positive cells in liver stem cells and no GFP-positive undifferentiated cells in bone marrow cells.

项目成果

Hoppo, T et al.: "Thy1-positive mesenchymal cells promote the maturation of CD49f-positive hepatic progenitor cells in the mouse fetal liver."Hepatology. (in press). (2004)

Hoppo, T 等人：“Thy1 阳性间充质细胞促进小鼠胎儿肝脏中 CD49f 阳性肝祖细胞的成熟。”肝病学。

Yasuchika K et al.: "Establishment of a highly efficient gene transfer system for mouse fetal hepatic progenitor cells."Hepatology. 36(6). 1488-1497 (2002)

Yasuchika K 等人：“建立小鼠胎儿肝祖细胞高效基因转移系统。”肝病学。

Yasuchika K, Hirose T, et al.: "Establishmen of efficient gene transfer system for mouse fetal hepatic progenitor cells"Hepatology. 6. 534-543 (2002)

Yasuchika K、Hirose T 等人：“小鼠胎儿肝祖细胞有效基因转移系统的建立”肝病学。

Azuma H, et al.: "Enrichment of hepatic progenitor cells from adult mouse liver."Hepatology. 37(6). 1385-1395 (2003)

Azuma H 等人：“从成年小鼠肝脏中富集肝祖细胞。”肝病学。

Baba S et al.: "Commitment of bone marrow cells to hepatic stellate cells in mouse."Journal of Hepatology. 40(2). 255-260 (2004)

Baba S 等人：“小鼠骨髓细胞对肝星状细胞的承诺。”肝脏病学杂志。