"体性"多能性幹細胞の分離・精製

“体细胞”多能干细胞的分离和纯化

基本信息

批准号：
14657306
负责人：
中辻憲夫
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657306/
关键词：
多能性幹細胞肝幹細胞 green fluorescent protein 骨髄細胞分化

项目摘要

本研究では、我々の入手している肝幹細胞、骨髄細胞をもとに、それらに共通して混在していると思われる"体性"多能性幹細胞を同定し、分離・精製することを目的として研究を開始した。我々が胎仔及び成体マウスから分離した肝幹細胞においては(安近ら,Hepatology,2002)(東ら,Hepatology,2003)、その詳細な特性解析の過程で肝幹細胞特異的な未知遺伝子を同定しつつあり、これらの遺伝子をマーカーとして用いることで、我々の獲得している肝幹細胞分画中に、より未分化な細胞が含まれていないかにつき現在検討を進めている。また、肝幹細胞から成熟肝細胞への分化誘導法の検討の過程にて幹細胞の分化誘導に必須と思われる細胞集団の同定・分離を行い(北方ら,Hepatology,2004,in press)、この細胞と肝幹細胞との細胞間相互作用を検討することで肝細胞系に分化誘導する新たな因子の同定、さらには骨髄細胞から肝細胞系へと分化可能な細胞集団の同定・分離法の確立が可能かどうかにつき検討している。この過程で我々は、肝臓中に骨髄細胞由来の星細胞が存在することを解明した(馬場ら,Journal of Hepatology,2004)。さらに、生殖細胞系列などのより未分化な細胞のみに発現することが知られているOct3/4のプロモーター下にgreen fluorescent protein(GFP)発現を示すトランスジェニックマウスを用いることで、現在我々が入手している肝幹細胞や骨髄細胞中からより未分化な細胞分離の検討を行っている。現在までに肝幹細胞中にはGFP陽性細胞は認められないが、骨髄細胞中にはGFP陽性の未分化細胞の存在を示唆する結果が得られており、flow cytometryにおいて幹細胞特性の一つと考えられるSide Population分画との相関関係を検討している。

这项研究的目的是基于我们获得的肝脏干细胞和骨髓细胞，识别，分离和净化，多能干细胞，这些干细胞似乎很常见。 In the liver stem cells that we have isolated from fetal and adult mice (Akachi et al., Hepatology, 2002) (To et al., Hepatology, 2003), we are now identifying unknown genes specific to liver stem cells in the process of detailed characterization, and by using these genes as markers, we are currently investigating whether or not the liver stem cell fractions we have acquired do not contain more undifferentiated cells.此外，在诱导从肝干细胞分化为成熟的肝细胞的过程中，我们已经鉴定出和孤立的细胞群体，这些细胞群体被认为对于诱导干细胞的诱导至关重要的细胞分化至关重要（Kokuhaku等，Hepatology，2004，在印刷中），并通过研究这些细胞和细胞之间的分离，可以识别这些细胞和分离的细胞，从而可以鉴定出脉络性的分离，这是否可以鉴定出既定的脉络及其在脉络中，我们是否可以鉴定我们是否可以识别我们的脉络脉冲，我们是否可以鉴定我们是否可以进行脉络细胞的群体，我们是否既可以识别我们的细胞又可以识别细胞的相互作用。从骨髓细胞到肝细胞线。在此过程中，我们发现肝脏中存在骨髓细胞（Baba等，肝病学杂志，2004年）。此外，通过使用Oct3/4启动子下表现出绿色荧光蛋白（GFP）表达的转基因小鼠，该小鼠仅在诸如生殖线等更不体化的细胞（例如种系）中表达，我们目前正在研究分离出更为分化的细胞与肝干细胞和骨髓细胞的分离。迄今为止，在肝干细胞中尚未观察到GFP阳性细胞，但结果表明骨髓细胞中GFP阳性未分化的细胞存在，我们正在检查与侧种群分数的相关性，这被认为是流式细胞术中的干细胞特性之一。