変異セリン:ピルビン酸トランスアミナーゼのエネルギー依存性分解

丝氨酸突变：丙酮酸转氨酶的能量依赖性降解

• 批准号: 09267217
• 负责人: 市山 新
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09267217/
• 关键词: 蓚酸; 原発性高蓚酸尿症1型; セリン:ピルビン酸トランスアミナーゼ; 変異蛋白質; エネルギー依存性蛋白質分解; 26Sプロテアソーム; 脱ユビキチン酵素; UBPファミリー脱ユビキチン酵素

原発性高蓚酸尿症1型(PH1)症例に検出された変異セリン:ピルビン酸トランスアミナーゼ(SPT)のエネルギー依存性分解の研究と平行して,脱ユビキチン酵素のクローニングを開始した。脱ユビキチン酵素はユビキチン化された蛋白質の分解過程でユビキチンの遊離のみならず他の役割も持つと推定され,酵母などでは多種類報告されている。動物でも機能の異なる種々の脱ユビキチン酵素が存在するという想定の下に,大腸菌体内でユビキチンとArg-β-Galの融合蛋白質を切断する活性を指標としてヒト脳のcDNAライブラリーからの新規脱ユビキチン酵素のクローニングを試み,且つデータベースから見い出された新規脱ユビキチン酵素と推定される遺伝子の産物の解析を行っている。この酵素は脱ユビキチン酵素のうちUBPファミリーに属するが,活性中心を構成すると考えられるヒスチジンを含む領域(His box)が既知のUBPの3倍以上の大きさを持つというユニークな構造をしている。検討の結果,大腸菌体内でユビキチンとArg-β-Galの融合蛋白質をユビキチンのC末端で切断する活性をもつことが明らかになったので,仮にnUBPと名付け,現在は組織分布と遺伝子座を調べている。変異SPTのエネルギー依存性分解に関しては,ウサギ網状赤血球溶血液系での解析を続行し,26Sプロテアソームとは異なるプロテアーゼの関与を示唆するデータ,変異SPTの消失が凝集等のよる除去ではなく確かに分解であることを示唆するデータは蓄積したが,問題のプロテアーゼ系を実体として捉えることは依然として困難であった。この分解に関与する酵母の遺伝子のスクリーニングもβ-GalあるいはURA3遺伝子産物との融合蛋白質の分解を指標とする限り正常SRTも不安定になるということで困難であった。変異SPTの分解には新しい視点も加え長期戦覚悟で引き続き取り組むことにしている。

Original 発 sexual high 蓚 aciduria type 1 (PH1) disease cases に 検 out さ れ た - different セ リ ン : ピ ル ビ ン acid ト ラ ン ス ア ミ ナ ー ゼ (SPT) の エ ネ ル ギ ー dependency と parallel decomposition の research し て, take off the ユ ビ キ チ ン enzyme の ク ロ ー ニ ン グ を began し た. Off ユ ビ キ チ ン enzyme は ユ ビ キ チ ン change さ れ た protein の decomposition で ユ ビ キ チ ン の free の み な ら ず he cut も の servants hold つ と presumption さ れ, yeast な ど で は variety report さ れ て い る. Function of animal で も の different な る kind 々 の ユ off ビ キ チ ン enzyme が exist す る と い う scenarios の に, coliform in vivo で ユ ビ キ チ ン と Arg - beta - Gal の fusion protein を cut す を る activity index と し て ヒ ト 脳 の cDNA ラ イ ブ ラ リ ー か ら の new rules to take off the ユ ビ キ チ ン enzyme の ク ロ ー ニ ン グ を み, and つ デ ー タ ベ ー ス か ら see い out さ れ た new rules to take off the ユ ビ キ チ ン enzyme と presumption さ れ る posthumous son 伝 の product line analytical を の っ て い る. こ の enzyme は ユ off ビ キ チ ン enzyme の う ち UBP フ ァ ミ リ ー に genus す る が, active center を constitute す る と exam え ら れ る ヒ ス チ ジ ン を containing む areas (ihs box) が already know の allocated 3 times の の big き さ を hold つ と い う ユ ニ ー ク な tectonic を し て い る. Beg の 検 as a result, the coliform in vivo で ユ ビ キ チ ン と Arg - beta - Gal の fusion protein を ユ ビ キ チ ン の C terminal で cut す る active を も つ こ と が Ming ら か に な っ た の で, 仮 に nUBP と pay け, now は organization distribution と heritage 伝 stroma を adjustable べ て い る. - different SPT の エ ネ ル ギ ー dependency decomposition に masato し て は, ウ サ ギ mesh red blood corpuscle dissolving blood system で の parsing を 続 し, 26 s プ ロ テ ア ソ ー ム と は different な る プ ロ テ ア ー ゼ の masato and を in stopping す る デ ー タ, - different SPT の disappear が agglutination etc. の よ る remove で は な く か indeed に decomposition で あ る こ と を in stopping す る デ ー タ は accumulation し た が, problem の プ ロ テ ア ー を ゼ department be body と し て catch え る こ と は still と し て difficult で あ っ た. こ の decomposition に masato and す る yeast の heritage 伝 son の ス ク リ ー ニ ン グ も beta Gal あ る い は URA3 heritage 伝 zi chan content と の fusion protein decomposition を の index と す る limit り normal SRT も unrest に な る と い う こ と で difficult で あ っ た. - different SPT の decomposition に は new し い viewpoints も plus え long-term 戦 覚 で bring enlightenment き 続 き group take り む こ と に し て い る.

项目成果

Oda,T.: "Induction by peroxisome proliferators and triiode hyroxine of serine:pyruvate/alamine:glyozylate amixotransfenase of rat liver" FEBS Lett.418・3. 265-268 (1997)

Oda, T.：“大鼠肝脏的过氧化物酶体增殖物和丝氨酸三碘羟色氨酸的诱导：丙酮酸/丙胺：乙醇酰化氨基转移酶”FEBS Lett.418・3（1997）。

Ishikawa,K.: "Pyridexal 5'-phesphate binding of a recombinant rat serine:pyruvate/alaxine:glyozylate aminotransferase." J.Biochem.119・5. 970-978 (1996)

Ishikawa, K.：“重组大鼠丝氨酸：丙酮酸/丙氨酸：乙酰化转氨酶的吡啶酮 5-磷酸盐结合。J.Biochem.119·5（1996）。”

Suzuki,T.: "Energy-dependent degradation of a mutant serine:pyruvate/alaxine:glyozylate aminotransferase in a primary hypeioteluria type 1 case." Intracellular Protein Catabolism(Advances in Experimental Melicine and Biology,Vol.389,ets.Suzuki,K.& Bond,J.

Suzuki,T.：“原发性高尿症 1 型病例中突变丝氨酸：丙酮酸/丙氨酰：甘氨酰转氨酶的能量依赖性降解。”

市山 新: "原発性高蓚酸尿症" Annual Review腎臓1996(長沢 俊彦,河辺秀月,伊藤克己,浅野泰,達雄仁 編). 232-238 (1996)

Arata Ichiyama：“原发性高草酸尿症”肾脏年度回顾 1996（Toshihiko Nagasawa、Hidetsuki Kawabe、Katsumi Ito、Yasushi Asano、Hitoshi Tatsuo，编辑）232-238（1996）。

市山 新: "内因性蓚酸の由来についての一つの作業仮説" 日本尿路結石症研究会第6回学術集会記録集. 53-64 (1997)

Arata Ichiyama：“关于内源性草酸起源的工作假设”日本尿石​​病研究会第 6 届学术会议记录 53-64（1997 年）。