神経分化誘導因子SDIA分子同定と再生医学的応用

神经元分化诱导因子SDIA的鉴定及其在再生医学中的应用

• 批准号: 13035025
• 负责人: 水関 健司
• 金额: $ 5.12万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research (2002)Kyoto University (2001)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13035025/
• 关键词: 神経変性疾患; パーキンソン病; 細胞移植治療; ES細胞; 霊長類; SDIA; ドーパミン神経; 網膜色素上皮細胞; 神経分化

パーキンソン病などの神経変性疾患に対する細胞移植治療では、移植材料の確保が避けて通れない問題である。この問題を解決するために、ES細胞から神経細胞を試験管内で効率よく誘導することが望まれている。我々は共培養系を用いて、いくつかの間質細胞にマウスES細胞から神経分化を促進する活性(SDIA, stromal cell-derived inducing activity)があり、中でも頭蓋骨由来の間質細胞であるPA6細胞は高率(90%以上)に神経細胞を誘導し、その30%をドーパミン神経へと分化させることを見いだしていた。本研究ではSDIAの分子同定を試みたが、現在のところ明確な結論に至っていない。そこで神経系再生医学の技術基盤を確立することを目的として、SDIA法により霊長類のES細胞からも神経細胞が誘導できるかを検討した。カニクイザルのES細胞をPA6細胞と2週間共培養した結果、97%のコロニーが凡神経マーカーNCAM陽性であった。細胞レベルでは45%の細胞がNCAM陽性、25%が成熟神経マーカーのTuJ陽性であり、SDIA法により霊長類のES細胞からも効率良く神経細胞が誘導されることがわかった。またドーパミン神経のマーカーであるTH(tyrosine hydroxylase)が80%のコロニーで陽性であり、細胞レベルでは35%の成熟神経がTH陽性であった。さらに高カリウム刺激により培養液中にドーパミンの放出がHPLC法により検出されたことから、機能的なドーパミン神経が効率良く誘導されることがわかった。興味深いことに、SDIA法で3週間の共培養後、8%のコロニーにサルのES細胞から網膜色素上皮細胞も誘導されることがわかった。網膜色素上皮細胞は網膜色素変性症の病変部位であり、将来的な細胞移植治療にSDIA法が応用されることが期待される。

Please make sure that the patients with sexual disorders are treated by cell transplantation, and that the transplantation materials are guaranteed to avoid any problems. In order to solve the problem, the ES cell is very important. The rate in the tube is the key to the problem. In our co-culture system, ES cells were induced to differentiate into cells (SDIA, stromal cell-derived inducing activity) to promote the activity of cells (SDIA, stromal cell-derived inducing activity). The rate of PA6 cells was high (more than 90%). In this study, the molecular structure of SDIA was determined and the results were clearly discussed in the present study. In the Department of Regenerative Medicine, the basic technology of regenerative medicine is to make sure that the purpose of the disease is to achieve the goal, and that the SDIA method is used to guide the development of ES cells. The results of 2-year co-culture of ES cells and PA6 cells were tested, and 97% of the results were collected. NCAM was tested by all gods. The results show that 45% of the cells are sensitive to NCAM, 25% of the mature cells are sensitive to TuJ, and the SDIA method is used to determine the rate of ES infection. TH (tyrosine hydroxylase), 80%, tyrosine hydroxylase, 35%, mature gods, TH, sex, sex. In the culture solution, the HPLC method was used to determine the rate of failure in the culture solution. This is the best way to improve the performance of the machine. After 3 times of co-culture with SDIA method, 8% of the samples were incubated in the presence of 8% of the total amount of ES cells. The site of membranous pigmented epithelium disease is not affected, and the future transplantation of fetal cells will be used to treat the disease. SDIA method is expected to be used.

项目成果

Kawasaki, H. et al.: "Generation of dopaminergic neurons and pigmented epithelia from primate ES cells by stromal cell-derived inducing activity"PNAS. 99. 1580-1585 (2002)

Kawasaki, H. 等人：“通过基质细胞衍生的诱导活性从灵长类 ES 细胞中生成多巴胺能神经元和色素上皮”PNAS。