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ウイルス細胞間移行タンパク質発現植物の同属異種ウイルス特異的な抵抗性機構の解明

阐明表达病毒细胞间转移蛋白的植物中同源和异源病毒特异性的抗性机制

基本信息

批准号：
13039004
负责人：
吉川信幸
金额：
$ 3.2万
依托单位：
Iwate University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

1)ACLSV-50KP遺伝子に一連(約50アミノ酸ずつ)の欠失変異を導入した欠失型50KP(ΔA〜ΔG)を作出し、蛍光タンパク質遺伝子と融合してNT植物細胞で発現した。その結果、C-末端側に欠出を導入したΔA、ΔBおよびΔCは細胞内および細胞間移行能や管状構造形成能を保持していたが、50KPのN末端から中央領域に欠失を導入したΔD、ΔE、ΔF、ΔGでは細胞間移行能は完全に失われていた。39KP-YFPとこれら欠失型50KP-CFPを共発現させることにより、39KP-YFPの細胞間移行の阻害に関わる領域を解析したところ、ΔA-CFP、ΔB-CFPおよびΔC-CFPとの共発現では、YFPとCFPの蛍光はほとんどの場合に単一細胞でのみ観察され、39KPも欠失型50KPも細胞間移行しなかった。一方、ΔD-CFP、ΔE-CFP、ΔF-CFPおよびΔG-CFPと共発現させた場合には、CFPの蛍光が単一細胞にとどまっているのに対して、39KP-YFP蛍光は次発現細胞から周辺細胞に移行した。2)50KPによる39KPの細胞間移行阻害がGINVに対する抵抗性の原因であるかどうかを調べるため、39KPの移行を阻害する欠失型50KP[ΔA(アミノ酸番号393-456を欠失)およびΔC(Δ287-346)]と阻害しないΔG(Δ36-125)を発現する形質転換N.occidentalisを作出し、GINV、ACLSVおよびASGVに対する反応を調べた。その結果、50KP、ΔA、ΔC、および50KP-GFPを発現する形質転換植物はGINVを接種しても全く病徴を示さず、また接種葉および上葉ともにウイルスの増殖は認められなかった。これに対し、NT植物、ΔG発現植物、GFP発現植物ではGINV感染の病徴が現れ、ウイルスの増殖も認められた。3)ΔA'発現植物にGINVを接種したところ、50KP、ΔA、ΔC、および50KP-GFP植物とは異なり、一部の接種個体では、接種葉のみでGINVの増殖が認められた。ティッシュ・プリント・ハイブリダイゼーションによりウイルスの分布を調べたところ、接種葉の葉身、主脈および葉柄からGINVが検出されたが、茎および上葉(葉身、主脈および葉柄)へのウイルスの移行は認められなかった。

1) the loss of ACLSV-50KP (about 50% acid) was detected in the deficient 50KP (Δ A ~ Δ G), and the fusion of NT plant cells was observed. The results of the experiment showed that the C-terminal terminal underinput Δ A, the delta B terminal Δ C-terminal intercellular migration energy and the 50KP N-terminal central domain underinput input Δ D, Δ E, Δ F, Δ G terminal intercellular migration energy were completely lost. In the field of field analysis of 39KP-YFP, 39KP-YFP, Δ A-CFP, Δ B-CFP, Δ C-CFP, YFP, CFP, and 39KP, there is a total detection of intercellular mobility, intercellular migration, and 39KP intercellular migration in the field of detection, delta, Δ, Δ, and 39KP, respectively. One party, Δ D-CFP, Δ E-CFP, Δ F-CFP receiver Δ G-CFP, have a total of three parts, namely, the combination of cells, the number of cells and the number of cells. 2) the reasons for the intercellular migration of 50KP and 39KP to block the resistance of GINV and 39KP, the loss of 50kp [delta A], the inhibition of G (Δ 36-125), the detection of N.occidentalis, GINV, ACLSV and so on. The results of the experiment, 50KP, Δ A, Δ C, 50KP, Δ A, Δ C, and the results of 50KP, Δ A, Δ C, and the results of the results, 50KP, Δ A, Δ C, Δ A, Δ A, Δ C, TGA, Δ A, Δ A, Δ C, TGA, AAA, Δ A, Δ C, TGA, Δ A, Δ C, TGA, AAA, Δ A, Δ C, TGA, AAA, Δ A, Δ C, TGA, Δ A, Δ C, T, A, A, Δ C, T, A, A, C, T, A, A, C Infected plants, NT plants, Δ G plants, GFP plants infected with GINV, infected plants, infected plants, infected plants and infected plants. 3) Δ A 'shows that the plant GINV is inoculated with a variety of genes, such as 50KP, Δ A, Δ C, a plant 50KP-GFP, a plant plant, and a plant plant, which is inoculated with GINV. The distribution of the body, the handle, the GINV, the stem, the upper part of the stem, the upper part of the body, the upper part of the stem, the upper part of the stem and the upper part of the stem.