Toll様受容体を介したプライミング効果による脂質メディエーター産生増強機構

Toll样受体介导的启动效应增强脂质介质产生的机制

• 批准号: 16017225
• 负责人: 石井 聡
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16017225/
• 关键词: 血小板活性化因子; PAF; アセチルCoA:リゾPAFアセチル転移酵素; プライミング; TLR4; MyD88; TRIF

リゾPAF-AT活性が高い腹腔マクロファージを野生型マウス及びTLR4、MyD88、TRIFノックアウトマウスから調製した。LPSで細胞を刺激するとTLR4依存的な酵素活性の二相性の上昇が、刺激後30分にピークに達するものと8時間以降に徐々に上昇するものとして観察された。興味深いことに前期相の活性上昇はMyD88依存的なのに対し、後期相はMyD88及びTRIFに非依存的であった。さらに、リゾPAF-AT活性はLPSばかりでなく生成物のPAFで細胞を刺激することによっても1分以内にピークに達する上昇を示した。そこでLPSで予め刺激したマクロファージに対してPAFを作用させたところ、LPSとの相乗的な酵素活性の上昇が後期相にのみ認められた。しかもこのLPSのプライミング効果もまたTLR4依存的かつMyD88及びTRIF非依存的であった。このリゾPAF-ATの同定(cDNAクローニング)を目的として、ブタ脾臓から酵素活性が高いタンパク質分画を各種カラムクロマトグラフィーで精製し質量分析計によって中に含まれる分子を同定したが、現在までにリゾPAF-ATの候補と思われるタンパク質は見つかっていない。この実験と平行して、アセチル転移酵素をはじめ各種転位酵素と相同性のある機能未知のタンパク質を遺伝子データベースから検索し、そのうちの有力候補分子を動物培養細胞に発現させてリゾPAF-ATの活性を指標にスクリーニングする実験も行っている。

リ ゾ PAF - AT high active が い abdominal マ ク ロ フ ァ ー ジ を wild-type マ ウ ス and び TLR4, MyD88, TRIF ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス か ら modulation し た. LPS を で cells stimulate す る と TLR4 dependent な enzyme activity の two-phase の rise が, stimulus after 30 に ピ ー ク に da す る も の と 8 time in に xu 々 に rise す る も の と し て 観 examine さ れ た. Interest as deep い こ と に の activity rise early phase は MyD88 dependent な の に し seaborne, late phase は MyD88 and び TRIF に of interdependent で あ っ た. さ ら に, リ ゾ PAF - an active は LPS ば か り で な く products の PAF を で cells stimulate す る こ と に よ っ て も within 1 minute に ピ ー ク に da す る rise を shown し た. そ こ で LPS で to め stimulus し た マ ク ロ フ ァ ー ジ に し seaborne て PAF を role さ せ た と こ ろ, LPS と の phase 乗 な enzyme activity の rise が late phase に の み recognize め ら れ た. The results of the <s:1> び <s:1> <s:1> <s:1> LPS <s:1> プラ プラ グ グ are また tlr4-dependent <s:1> MyD88 and び trif-independent であった. こ の リ ゾ PAF - AT の with fixed (cDNA ク ロ ー ニ ン グ) を purpose と し て, ブ タ splenic か ら high enzyme activity が い タ ン パ ク mass points draw を various カ ラ ム ク ロ マ ト グ ラ フ ィ ー で refined し quality analysis meter に よ っ て in に containing ま れ を る molecules with fixed し た が, now ま で に リ ゾ PAF - AT の alternate と think わ れ る タ ン パ ク The quality って can be found in って って な な. こ の be 験 と parallel し て, ア セ チ ル planning shift enzyme を は じ め various planning an enzyme と identity の あ る function unknown の タ ン パ ク qualitative を heritage 伝 son デ ー タ ベ ー ス か ら 検 し and そ の う ち の powerful backup molecular を animal culture cell に 発 now さ せ て リ ゾ PAF - AT を の activity index に ス ク リ ー ニ ン グ す る be 験 も line っ て い る.

项目成果

Attenuation of folic acid-induced renal inflammatory injury in platelet-activating factor receptor-deficient mice

• DOI: 10.2353/ajpath.2006.050634
• 发表时间: 2006-05-01
• 期刊: AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY
• 影响因子: 6
• 作者: Doi, K;Okamoto, K;Noiri, E
• 通讯作者: Noiri, E

Platelet-activating factor receptor deficient mice show an unaltered clearance of Haemophilus influenzae from their respiratory tract.

血小板激活因子受体缺陷小鼠的呼吸道中流感嗜血杆菌的清除率没有改变。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Shock 22
• 作者: Branger;J.;Wieland;C.W.;Florquin;S.;Maris;N.A.;Pater;J.M.;Speelman;P.;Shimizu;T.;Ishii;S.;van der Poll;T.
• 通讯作者: T.

Identification of T cell death-associated gene 8 ( TDAG8) as a novel acid sensing G-protein-coupled receptor

• DOI: 10.1074/jbc.m407832200
• 发表时间: 2005-03-11
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Ishii, S;Kihara, Y;Shimizu, T
• 通讯作者: Shimizu, T

Involvement of the platelet activating factor receptor in host defense against Streptococcus pneumoniae during postinfluenza pneumonia.

血小板激活因子受体参与流感后肺炎期间宿主对肺炎链球菌的防御。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Am.J.Physiol. 290
• 作者: van der Sluijs;K.F.;van Elden;L.J.R.;Nijhuis;M.;Schuurman;R.;Florquin;S.;Shimizu;T.;Ishii;S.;Jansen;H.M.;Lutter;R.;van der Poll;T.
• 通讯作者: T.

Stimulation of erythrocyte ceramide formation by platelet-activating factor

• DOI: 10.1242/jcs.01730
• 发表时间: 2005-03-15
• 期刊: JOURNAL OF CELL SCIENCE
• 影响因子: 4
• 作者: Lang, PA;Kempe, DS;Wieder, T
• 通讯作者: Wieder, T