腸管病原性大腸菌の感染初期過程における腸上皮バリア破壊メカニズムの解析

致病性大肠杆菌感染早期肠上皮屏障破坏机制分析

• 批准号: 16017255
• 负责人: 三宅 眞実
• 金额: $ 4.86万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16017255/
• 关键词: ミトコンドリア; Map; In Vivo expression technology(IVET); 腸上皮バリア; tight junction; EPEC下痢症; 腸管病原性大腸菌; 下痢; 腸管上皮; 細菌感染

本研究では、腸管病原性大腸菌(EPEC)が引き起こす腸上皮バリア破壊をEPEC下痢症に繋がる重要な病理変化と捉え、そのメカニズムを解析することで、EPEC下痢発症メカニズム解明を試みた。バリア破壊に関与するEPEC因子として、菌体表層蛋白intiminと、3型分泌装置により分泌されるエフェクター分子Tirを同定した。両者は菌が宿主細胞に密着する際に重要な働きをする。得られた結果は、菌が宿主細胞と密着する条件下でのみ分泌されるバリア破壊因子があることを示唆していた。[^<35>S]アミノ酸を用いたパルス標識実験で、Tir-intimin結合依存性に分泌される蛋白を見いだし、その分子量(約25kDa)からMapと呼ばれるエフェクターがバリア破壊因子である可能性を疑った。そこでMap欠損株を作製したところ、そのバリア破壊能は大きく低下していた。Mapは宿主細胞質内に分泌されると、ミトコンドリアに集積することが知られている。MapのN末端アミノ酸配列を調べるとミトコンドリア移行シグナルを見いだしたため、ミトコンドリア移行に重要と思われる疎水性アミノ酸1個を電荷を持つアミノ酸に置換した。この変異Mapはミトコンドリア移行性を失っており、同時にバリア破壊活性も消失していた。すなわち、Mapがバリア破壊を引き起こすには、一旦ミトコンドリアに移行することが必要と考えられた。しかしながら、Mapの分泌量は、EPECが宿主と密着することとは無関係で、上記分子量約25kDaの蛋白はMapではない可能性が考えられた。総合的に考えた結果、宿主依存性にEPECが分泌するバリア破壊因子が他にもあると考え、宿主依存性に分泌されるエフェクターを網羅的に同定する実験系を構築、スクリーニングを実施したところ、1個の陽性クローンが得られた。そのDNA配列はこれまでエフェクターとして報告されていないタンパクのもので、新規エフェクターである可能性が示唆された。

In this study, pathogenic bacteria (EPEC) were introduced from the epithelium, dysentery, dysentery and dysentery in EPEC. The expression of EPEC factor, bacterial surface protein intimin, and type 3 secretory device were identical with that of molecular Tir. The host cell of the fungus is closely related to the importance of the host. The results showed that under the condition that the host cells of the bacteria were closely packed, the bacteria secreted a lot of bacteria, and the breakage factor showed that they were infected. [^ & lt;35>S] the molecular weight (about 25kDa), the molecular weight (about Map), the possibility of breakage factor, the possibility of breakage factor. If you don't have a Map, you can do a lot of damage, and you can make a difference. The Map host cells secrete a lot of drugs, and the cells of the host cells are secreted by each other. Map

项目成果

Role of C-terminal regions of the C-terminal fragment of Clostridium perfringens enterotoxin in its interaction with claudin-4.

• DOI: 10.1016/j.jconrel.2005.07.008
• 发表时间: 2005-11
• 期刊: Journal of controlled release : official journal of the Controlled Release Society
• 作者: A. Takahashi;M. Kondoh;A. Masuyama;M. Fujii;H. Mizuguchi;Y. Horiguchi;Yoshiteru Watanabe

Binding. of intimin with Tir on the bacterial surface is prerequisite for the barrier disruption induced by enteropathogenic Escherichia coli.

捆绑。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Biochem.Biophys.Res.Commun. 337・3
• 作者: Miyake;M. et al.
• 通讯作者: M. et al.

Role of N-terminal amino acids in the absorption-enhancing effects of the C-terminal fragment of Clostridium perfringens enterotosin.

N 端氨基酸在产气荚膜梭菌肠毒素 C 端片段吸收增强作用中的作用。

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Pharmacol. Exp. Ther. 314
• 作者: Masuyama;A.;et al.
• 通讯作者: et al.

Preparation of a claudin-targeting molecule using a C-terminal fragment of Clostridium perfringens enterotoxin

• DOI: 10.1124/jpet.105.093351
• 发表时间: 2006-01-01
• 期刊: JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND EXPERIMENTAL THERAPEUTICS
• 影响因子: 3.5
• 作者: Ebihara, C;Kondoh, M;Watanabe, Y
• 通讯作者: Watanabe, Y