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脂質代謝を制御する機能分子プローブの創製

创建控制脂质代谢的功能分子探针

基本信息

批准号：
16073215
负责人：
供田洋
金额：
$ 18.11万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

・新規プローブの探索研究では、脂質代謝に関する様々な評価系として、1)マクロファージ脂肪滴蓄積阻害を評価する系、2)ジアシルグリセロール転移酵素(DGAT)を評価する系や3)細菌の細胞壁合成に重要なウンデカプレニルピロフォスフェート合成酵素(UPPS)阻害を評価する系について重点的に行った。その結果、以下の真菌由来の3種6成分の新規化合物を発見した。1)からは、インドール環とキナソリン環が架橋したquinadoline類AとBを発見した。2)からは、ジヒドロナフトピラノン環が二量体を形成したdinapinone A とBの立体異性体を発見し、これらの混合比により活性が大幅に変化することを明らかとした。3)からは、スピロを介した5員環をもつspirohexaline類 AとBを発見し、立体化学の解析から、A成分が既知のviridicatumtoxinのエナンチオマーであることを証明した。この他に今期、新規評価系として、ヒト由来のDGAT1あるいはDGAT2を導入した酵母を利用したアッセイ系を構築した。・プローブの作成と作用メカニズム研究では、脂肪滴形成阻害剤beauveriolideのビオチン標識体による解析から、ミクロソーム画分中に結合タンパク質を数種見出した。その一つは、ACAT抗体による解析から、本標的分子と推定しているACATであることが明らかとなってきた。他のタンパク質については、MALDI-TOF-MSなどにより同定を行なう。さらに、ACAT2に選択的な阻害剤pyripyropene A に関しては、ACAT2の一部領域をACAT1の類似領域へと置換したキメラタンパク質を作製することで、あるモチーフ(492〜494番目のアミノ酸残基QVS)が本化合物のACAT2選択的阻害に重要な役割を果たしていることを明らかにした。

·New regulations for the exploration of lipid metabolism include: 1) evaluation of lipid accumulation inhibition; 2) evaluation of lipid transporter enzymes (DGAT); 3) evaluation of inhibition of lipid synthase enzymes (UPPS) important for bacterial cell wall synthesis. The results showed that 3 new compounds with 6 components from the following fungi were found. 1) The bridge between quinazoline class A and B is revealed. 2) The stereoisomers of dinapinone A and B are discovered, and the mixture ratio of dinapinone A and B is greatly changed. 3) The 5-membered ring A and B of spirohexaline were discovered, and the stereochemical analysis of A component was proved. This new evaluation system is based on DGAT1 and DGAT2. In this study, several kinds of fat droplet formation inhibitors, beauveriolide, were identified. ACAT antibody analysis, molecular estimation of the subject matter MALDI-TOF-MS is the same as MALDI-TOF-MS. In addition, the protective agent pyripyrotene A selected in ACAT2 is related to the substitution of a domain similar to ACAT1 in ACAT2. The acid residues QVS (492 ~ 494) are important for the protective effect of ACAT2.