マウスPiwiファミリーを介したRNAiカスケードとレトロトランスポゾンの活性化

通过小鼠 Piwi 家族进行 RNAi 级联和逆转录转座子激活

• 批准号: 17026024
• 负责人: 宮川 さとみ
• 金额: $ 3.58万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17026024/
• 关键词: Piwi; RNAi; 精子形成; レトロトランスポゾン; DNAメチル化

PiwiファミリーはRNAiに重要な役割を果たしているタンパク質群である。我々はこのファミリーに属するマウスの遺伝子、Mili(Miwi like)を単離し、MILIノックアウト(MILI-KO)マウスを作製した。その結果、雄マウスでは生後10日前後から精子形成に異常が認められ、減数分裂中期以降の生殖細胞は全く形成されていなかった。このMILI-KOマウスの精巣では、レトロトランスポゾンIAPやLine1の転写産物が増加していた。これらのレトロトランスポゾンは、通常はプロモーター領域のCpGがメチル化されているために発現が抑制されていることが知られているが、MILI-KOマウスの精巣では、精子形成過程の非常に早い段階から、これらのレトロトランスポゾンのCpGメチル化の低下が観察された。この結果は、MILI-KOはレトロトランスポゾンゲノムにおけるメチル化の成立(de novoメチル化)に重要な役割をはたしていることを示唆している。また、抗MILI抗体による胎仔精巣抽出液の免疫沈降を行ったところ、26-28塩基のsmall RNA(piRNA ; Piwi interacting RNA)がMILIと結合することを見出した。さらにその中に、レトロトランスポゾンに対する配列も含まれていることが明らかとなった。また、MILI-KOマウスの胎仔精巣中には、これらのpiRNAは存在していないことも見出した。以上の結果は、MILIがpiRNAの形成過程、もしくは安定性にかかわっていることを示しており、また、DNAのメチル化には、塩基特異性が存在することから、MILIに結合するpiRNAが、何らかの分子機構を介して、ゲノム上のde novoメチル化の位置を決めるガイドとして、機能しているものと考えられる。

Piwi フ ァ ミ リ ー は RNAi に important な "を cut fruit た し て い る タ ン パ ク mass group で あ る. I 々 は こ の フ ァ ミ リ ー に genus す る マ ウ ス の heritage 伝, his son (Miwi like) を 単 し, his ノ ッ ク ア ウ ト (the case - KO) マ ウ ス を cropping し た. そ の results, male マ ウ ス で は born after 10 か ら abnormal spermatogenesis に が recognize め ら れ, mid meiosis in の germ cell は く form all さ れ て い な か っ た. こ の his - KO マ ウ ス の fine 巣 で は, レ ト ロ ト ラ ン ス ポ ゾ ン IAP や, Line1 の product planning write が raised plus し て い た. こ れ ら の レ ト ロ ト ラ ン ス ポ ゾ ン は, usually は プ ロ モ ー タ ー field の CpG が メ チ ル change さ れ て い る た め に 発 now が inhibit さ れ て い る こ と が know ら れ て い る が, his KO マ ウ ス の fine 巣 で は, sperm formation の very early に い Duan Jie か ら, こ れ ら の レ ト ロ ト ラ ン ス ポ ゾ ン の CpG メ チ ル Youdaoplaceholder7 lower が観 cha された. こ は の results, the case - KO は レ ト ロ ト ラ ン ス ポ ゾ ン ゲ ノ ム に お け る メ チ ル change の established (DE novo メ チ ル) cut を に important な service は た し て い る こ と を in stopping し て い る. ま た, resist his antibody に よ る tire wang jing 巣 extract の immune sink を line っ た と こ ろ, 26-28 salt base の small RNA (piRNA; Piwi interacting RNA) が his と combining す る こ と を shows し た. さ ら に そ の に, レ ト ロ ト ラ ン ス ポ ゾ ン に す seaborne る match column も containing ま れ て い る こ と が Ming ら か と な っ た. Youdaoplaceholder0, MILI-KO ウス ウス, に に, <s:1> れら, <s:1> れら れら, <s:1> piRNA <e:1> in the sperm nests of the tubules are present, <s:1> て な な と と と と た た た な な と と と と た た た た た な な と と と た た た is seen. は の results above, his が piRNA の formation, も し く は stability に か か わ っ て い る こ と を shown し て お り, ま た, DNA の メ チ ル change に は exist, salt base specificity が す る こ と か ら, his に combining す る piRNA が, ら か の molecular institutions を interface し て, ゲ ノ ム の DE Novo メ チ ル change position の を definitely め る ガ イ ド と し て, function し て い る も の と exam え ら れ る.

项目成果

A novel class of small RNAs bind to MILI protein in mouse testes

• DOI: 10.1038/nature04916
• 发表时间: 2006-07-13
• 期刊: NATURE
• 影响因子: 64.8
• 作者: Aravin, Alexei;Gaidatzis, Dimos;Tuschl, Thomas
• 通讯作者: Tuschl, Thomas