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アンチセンスRNAによる遺伝子発現制御機構の解明

反义RNA阐明基因表达控制机制

基本信息

批准号：
17026038
负责人：
清澤秀孔
金额：
$ 3.58万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

1)インプリント遺伝子座におけるアンチセンスRNAのcharacterization昨年度より引き続いてマイクロアレイ解析より発現を確認した既知インプリント遺伝子の反対鎖から発現しているアンチセンスRNAに関して、近交系マウス同士のFlの遺伝的多型情報を用い、そのインプリント状態を解析した。現在報告されているほぼ全てのインプリント遺伝子座(インプリント候補を含む75個)のアンチセンスRNAのインプリント状態の解析を試み、発現の見られなかった5個と多型を確認できなかった25個を除いて、インプリント状態を確認した。父性発現をする遺伝子のアンチセンスRNAは父性発現をし、母性発現をする遺伝子のアンチセンスRNAは母性発現であるものがほとんどであったが、3例においてセンス鎖とアンチセンス鎖のインプリント状態が別々であった。このうち2例は既知のアンチセンスRNAであったが、1例は新規であった。2)低分子RNA生産とRNA干渉経路の関わりより機能性の高いアンチセンスRNAをスクリーニングすることを目的とし、ヒト・マウスで高度に保存されているセンス-アンチセンス遺伝子対を選びノーザン解析を行ったところ、センス鎖とアンチセンス鎖の重なる領域から100ヌクレオチド以下の低分子RNAや、ラダー状のプロセスされたようなRNAを同定した。これら低分子RNAとRNA干渉経路との関係を追求するため条件的にDicer遺伝子がノックアウトされるES細胞を作製した。また、DicerをターゲットとしたsiRNAによりDicer RNAがノックダウンされることも確認したので、今後、これらES細胞やsiRNAを利用し、センス-アンチセンスRNAの発現とRNA干渉の関係を追求していく予定である。

1) The characterization of the gene expression vector was confirmed by the analysis of the gene expression in the last year, and the analysis of the gene expression status of the known gene expression vector was confirmed by the analysis of the gene expression vector in the last year. Now we report that the analysis of the status of all the candidate loci (including 75 candidate loci) and the status of the candidate loci RNA was tested and found, and 5 polytypes were confirmed. Paternal development: The development of paternal development, maternal development, maternal development, paternal development, maternal development, paternal development, maternal development, maternal development, paternal development, maternal development, maternal development 2 cases of known RNA, 1 case of new regulation 2)Low-molecular RNA production and RNA stem pathway are related to functional, high-level, high-level, high-level preservation of low-molecular RNA, and high-level, high-level preservation of low-molecular RNA. The same RNA was used in the process. The relationship between low molecular weight RNA and RNA stem cells was investigated. The relationship between Dicer RNA and siRNA expression in ES cells was determined in the future.