磁気マイクロアレイを用いた1細胞トラップ技術の開発

利用磁性微阵列开发单细胞捕获技术

• 批准号: 18038040
• 负责人: 朝日 透
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Waseda University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18038040/
• 关键词: 磁気マイクロアレイ; 磁性化細胞; Raji細胞; 軟磁性体; 無電解めっき法; 細胞間シグナル伝達物質; 磁気誘導; 磁気ナノ粒子

近年、1細胞レベルで分析するための要素技術の開発が行われている。レーザーや電気化学的な力を利用した技術が報告されているが、大型の装置を必要とするため、他の手法の開発も待望されている。本研究では、磁気誘導による1細胞トラップ技術を開発することを目的としている。磁性体をアレイ化した磁気マイクロアレイを作製し、抗体をアセンブルした磁気ナノ粒子を用いることで、磁気誘導によりターゲット細胞をトラップする。本細胞トラップ技術により作製された細胞アレイは、細胞間シグナル伝達物質解析における有用なツールとなることが予測され、創薬領域に大きく貢献すると期待される。シリコン基板上のマイクロサイズのホールアレイに無電解めっき法により、CoNiFe面内軟磁性体を導入し、磁気マイクロアレイを作製した。また、細胞の磁性化として、磁性細菌により合成されたProtein A発現磁気ナノ粒子を用いた。Raji細胞(B cell line)にマウス由来抗CD19抗体を導入した後、抗マウスIgG抗体固定化磁気ナノ粒子を導入し、細胞への磁性化を行った。この磁性化細胞を3種類の磁気マイクロアレイ上に導入し、洗浄後、基板表面の顕微鏡観察を行った。その結果、磁性ドットが基板面より突き出て埋め込まれた基板Aではその突き出た磁性ドットの側面に細胞がトラップされ、また基板面と同じ高さで埋め込まれた基板Bでは磁性ドットの上に細胞が観察された。一方、埋め込まれた高さが基板面に満たない基板Cでは細胞のトラップは観察されず、チェーン状の未反応磁気ナノ粒子の凝集体(1マイクロ程度)がドット内に突き刺さっているような形で観察された。以上の結果より、基板面と同じ高さで埋め込まれたCoNiFe面内軟磁性体の磁気マイクロアレイを用いることにより、1つの細胞のトラップが可能であることが実証された。

In recent years, the development of cell analysis technology has been in progress. The use of electrical and chemical technologies is reported in the development of large-scale devices and other technologies. This study is aimed at developing a cell culture technique for magnetic induction. Magnetic particles can be induced by magnetic field. The present cell technology is expected to contribute greatly to the field of cell biology, intercellular chemistry, and substance analysis. CoNiFe in-plane soft magnetic materials are introduced into and manufactured by electroless method. Protein A is synthesized by cells and magnetic bacteria, and is used to generate magnetic particles. Raji cells (B cell line) were transfected with anti-CD19 antibody, and then transfected with anti-CD19 IgG antibody immobilized magnetic particles. Three types of magnetized cells are introduced into the substrate, washed, and examined by microscopes. As A result, the substrate surface of the magnetic substrate is exposed to the magnetic surface of the substrate A. The substrate surface of the magnetic substrate is exposed to the magnetic surface of the substrate B. The substrate A is exposed to the magnetic surface of the substrate B. A square, buried, high, substrate surface, substrate C, cell surface, cell surface, As a result, the substrate surface is the same as the height of the CoNiFe in-plane soft magnetic material.