权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

低分子量G蛋白質の活性調節におけるイソプレニル化酵素の役割

异戊二烯化酶在调节低分子量 G 蛋白活性中的作用

基本信息

批准号：
20054018
负责人：
松岡功
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Takasaki University of Health and Welfare
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はこれまでに蛍光標識したGGTaseおよびFTaseの基質ペプチドを用いて細胞のFPPやGGPPがHMG-CoA還元酵素阻害薬処理後ダイナミックに変化することを示した。また、この方法を応用して内因性のGGTaseおよびFTaseの活性を測定し、Gタンパク質共役型受容体刺激がGGTaseやFTase(の活性化を増大させることを見出した。今回はその作用機構について検討した。血管内皮細胞において、リゾホスファチジン酸(LPA)やトロンビン、スフィンゴシン1リン酸(S1P)は、内因性のFTase活性を増大させた。この反応は細胞を百日咳毒素で処理すると抑制されることから、Giを介した反応であると考えられた。このFTaseの活性化はPI3キナーゼ阻害薬や、ERK阻害薬、p38MAPキナーゼ阻害薬では影響されなかったが、チロシンキナーゼ阻害薬のPP2により抑制された。また、βγサブユニットの機能を阻害するβARKのc末端をアデノウイルスにより発現させると抑制された。FTaseは、FTaseαとFTaseβのヘテロダイマーで機能的な酵素を構成する。HEK293細胞にFTaseαとFTaseβのcDNAを発現させると、FTase活性の増大が認められた。このリコンビナント酵素の活性調節も、内皮細胞で認められた制御機構と同様の性質を示した。このことから、イソプレニル転移酵素のうち少なくともFTaseの活性はG蛋白質のβγサブユニットの下流でチロシンリン酸化を介して制御されることが示唆された。

I 々はこれまでに蛍 light logo した GGTase および FTase の matrix ペプチドを with いて cells の FPP や GGPP が HMG - CoA also yuan enzyme inhibitor against 薬処 reason after ダイナミックに variations change することを shown した. また, この way を応 with して endogenous の GGTase および FTase の active を determination し, G タンパク under let body type total service quality が GGTase や FTase (の activeness を raised large させることを shows した. This time, そそそ is in contact with にそて検て検て検 to discuss た. Vascular endothelial cell において, リゾホスファチジン acid (LPA) やトロンビン, スフィンゴシン 1 リン acid (S1P) は, endogenous の FTase active を raised large させた. この anti 応は cells を pertussis toxin で処 Richard すると inhibit されることから, Gi を dielectric した anti 応であると exam えられた. この FTase の activeness は PI3 キナーゼ resistance against 薬や, ERK resistance against 薬, p38MAP キナーゼ resistance against 薬では influence されなかったが, チロシンキナーゼ resistance against 薬の PP2 により inhibit された. また, beta, gamma サブユニットの function を resistance against する beta ano の c terminal をアデノウイルスにより発 now させると inhibit された. The な enzymes を that constitute the functions of FTase ヘテロダ, FTaseαと, FTaseβ ヘテロダヘテロダ and で constitute する. HEK293 cells に FTase alpha と FTase beta の cDNA を発 now させると, FTase active の raised large がめられた. The <s:1> リコリコビナトトトト enzyme <s:1> activity regulation <e:1>, endothelial cell で recognition められた control mechanism と is similar. The properties を show that it is た. このことから, イソプレニル planning shift enzyme のうち less なくとも FTase の active はの G protein beta gamma サブユニットの obscene でチロシンリン acidification を interface して suppression されることが in stopping された.