異常分泌タンパク質のERADエスケープとその相補的分解機構の解析

异常分泌蛋白的ERAD逃逸及其互补降解机制分析

• 批准号: 20059002
• 负责人: 新谷 尚弘
• 金额: $ 4.1万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20059002/
• 关键词: 小胞体関連分解(ERAD); 小胞輸送; タンパク質品質管理機構; タンパク質分解; 異常分泌タンパク質; 出芽酵母; リソソーム・液胞

出芽酵母カルボキシペプチダーゼY(CPY)の255番目のグリシンがアルギニンに置換された変異型カルボキシペプチダーゼY(CPY*)は小胞体関連分解(ERAD)を受ける異常分泌タンパク質のモデル基質として広く利用されている。この基質に分泌タンパク質インベルターゼを融合したCPY*-Invは小胞体に留まらずに液胞で分解された。このことから、ERADと小胞体からの輸送は競合していることが分かった。すなわち、タンパク質の分泌効率は、分泌タンパク質とERAD装置や輸送装置との親和性やそれぞれの小胞体内での濃度に依存する反応動力学で説明できる。シングルドメインからなる単純な分泌タンパク質のERAD装置や輸送装置との親和性は、分泌タンパク質の熱力学的安定性に依存することが考えられた。そこで、CPYの255番目のグリシンを他のすべてのアミノ酸に置換した変異体シリーズを作製し、それぞれの野生株、ERAD欠損株、液胞プロテアーゼ欠損株に置ける半減期を解析した。その結果、大半の変異体はERADで分解を受けたが、バリン置換体は主に液胞で分解された。しかし、CPYの小胞体エクスポートレセプターErv29の欠損株では小胞体に留まり分解された。変異体の熱力学的安定性を解析するために、それぞれの変異体のプロテアーゼ耐性を調べた。野生型CPYは加えたトリプシンに対して非常に安定であったのに対し、CPY*は著しく不安定であり、バリン置換体はそれらの中間的な安定性を示した。このことより、分泌タンパク質の安定性と小胞体からの輸送効率は相関関係にあり、輸送とERADは競合していることが示唆された。

Saccharomyces cerevisiae (CPY) was divided into two groups: yeast (CPY), yeast (yeast), yeast (Saccharomyces cerevisiae), Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces cerevisiae. In this study, we express the fusion of CPY*-Inv, the small cell body, the liquid cell, and the decomposition of the liquid cell. The small cell bodies of ERAD were collected, and the cells were divided into two parts. The secretion rate, the secretion rate, the ERAD device, the delivery device, and the sex factor, the degree of dependence in the cytosol, the dynamics of the body, the rate of secretion, the rate of secretion, the rate of The ERAD device, the sex, the stability of mechanics, the dependence, the sensitivity, the stability, the stability. The wild plants, ERAD-deficient plants, ERAD-deficient plants and liquid cells were analyzed in the first half of the year. The results showed that most of the samples were decomposed by ERAD, and the liquid cells were decomposed by the host cell. CPY, CPY, small cell body, small cell body, small cell body, The stability of mechanics is analyzed in this paper. The wild type CPY is very stable, the CPY* is very stable, the wild type is unstable, and the stability is displayed in the middle of the system. The small cell body is stable, the cell body is stable, the delivery rate is different, the ERAD is closed, and the instigation is indicated.

项目成果

The conserved oligomeric Golgi complex is involved in double-membrane vesicle formation during autophagy.

• DOI: 10.1083/jcb.200904075
• 发表时间: 2010-01-11
• 期刊: The Journal of cell biology
• 作者: Yen WL;Shintani T;Nair U;Cao Y;Richardson BC;Li Z;Hughson FM;Baba M;Klionsky DJ
• 通讯作者: Klionsky DJ

Characterization and expression analysis of a maltose-utilizing(AML)cluster in Aspergillus oryzae

米曲霉麦芽糖利用 (AML) 簇的表征和表达分析

• 发表时间: 2010
• 期刊: Fungal Genetics and Biology 47
• 作者: Sachiko Hasegawa;Masahiro Takizawa;Haruhiko Suyama;Takahiro Shintani;Katsuya Gomi
• 通讯作者: Katsuya Gomi

Fluorescence microscopy-based assays for monitoring yeast Atg protein trafficking.

• DOI: 10.1016/s0076-6879(08)03204-7
• 发表时间: 2008
• 期刊: Methods in enzymology
• 作者: T. Shintani;F. Reggiori

分泌タンパク質の小胞体からのエクスポートと小胞体関連分解は競合する

内质网输出和内质网相关的分泌蛋白降解竞争

• 发表时间: 2009
• 作者: 須山研吾;堀瑞枝;五味勝也;新谷尚弘
• 通讯作者: 新谷尚弘

A luminal misfolded protein retaining the endoplasmic reticulum exit signal bypasses the ER-associated degradation and is sorted to the vacuole for degradation by the vacuolar sorting recentor Vps10

保留内质网退出信号的管腔错误折叠蛋白绕过 ER 相关降解，并被液泡分选中心 Vps10 分选至液泡进行降解

• 发表时间: 2008
• 作者: Kengo Suyama;Katsuya Gomi Takahiro Shintani
• 通讯作者: Katsuya Gomi Takahiro Shintani