正の選択を制御するペプチドの解析

控制正选择的肽分析

• 批准号: 20060036
• 负责人: 八代田 英樹
• 金额: $ 6.4万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20060036/
• 关键词: 免疫学; プロテアソーム; 胸腺; T細胞; シャペロン

適応免疫応答の中枢を担うT細胞は胸腺の中で増殖・分化するが、この際ランダムな遺伝子再編成により作り出された多様なT細胞の中から、有用な細胞のみを生存させる"正の選択(ポジティブセレクション)"と、自分の身体の成分と強く反応する細胞を消去する"負の選択(ネガティブセレクション)"の2段階の選択が行われる。これまで、胸腺髄質上皮細胞(mTEC)において組織特異的抗原を発現させる転写因子AIREの発見やmTECの分化に必要なシグナルの同定など負の選択の機構の理解は進んでいたが、胸腺皮質上皮細胞(cTEC)で行われる正の選択の具体的なメカニズムは殆ど不明であった。申請者らはcTECに特異的に発現するプロテアソームの新規触媒サブユニットβ5tおよび特異な酵素学的性質を持つ"胸腺プロテアソーム"を発見し、CD8^+ T細胞の分化に必須であることを見出した。プロテアソームによるタンパク質分解産物は主要組織適合性複合体(MHC)クラスIに提示される抗原ペプチドとして利用され、CD8^+細胞傷害性T細胞が自己と非自己を識別するための旗印となることから、胸腺プロテアソームが正の選択のための特別なペプチドレパートリーを作り出している可能性が強く示唆される。本年度はβ5tが胸腺特異的に発現する機構に関して解析を行った。まず、ルシフェラーゼアッセイを用いたプロモーター解析を行い胸腺特異的な発現に必要なプロモーター領域を同定した。次にβ5tを発現していない細胞でβ5tを発現させるような転写因子を探索し、候補蛋白質としてFoxN1を同定した。現在、cTEC細胞において実際にFoxN1がβ5tの発現に関与しているのかどうか検討中である。

Optimum 応 immune 応 answer の central を bear う t-cell は thymus の で す raised colonization, the differentiation る が, こ の interstate ラ ン ダ ム な heritage 伝 son again plait に よ り as り out さ れ た others more な T cells in の か ら, useful な cell の み を survival さ せ る "is の sentaku (ポ ジ テ ィ ブ セ レ ク シ ョ ン)" と, you の の body composition と く reverse 応 す る cells を elimination す る For negative selection, choose 択(ネガティブセレ ショ ショ ショ ショ). For <s:1> two-order selection, choose the 択が line われる. こ れ ま で, thymus, marrow qualitative epithelial cells (mTEC) に お い て tissue specific antigen を 発 now さ せ る planning write factor AIRE の 発 see や mTEC の differentiation に necessary な シ グ ナ ル の with fixed な ど negative の sentaku の institutions の understand は into ん で い た が, thymic epithelial cells of the cortex (cTEC) line で わ れ る is の sentaku の specific な メ カ ニ ズ ム は Almost <s:1> unknown であった. Applicants ら は cTEC に specific に 発 now す る プ ロ テ ア ソ ー ム の new rules catalyst サ ブ ユ ニ ッ ト beta 5 T お よ び learn the nature of the specific な enzyme を hold つ "thymus プ ロ テ ア ソ ー ム" を 発 し, CD8 + T cells の ^ differentiation に must で あ る こ と を shows し た. プ ロ テ ア ソ ー ム に よ る タ ン パ ク decomposition product quality は main organization fit complex (MHC) ク ラ ス I に prompt さ れ る antigen ペ プ チ ド と し て using さ れ, CD8 harmful T ^ + cells が と not themselves を recognition す る た め の flags printed と な る こ と か ら, thymus プ ロ テ ア ソ ー ム が is の sentaku の た め の special な ペ プ Youdaoplaceholder0 チドレパ トリ トリ を を make a チドレパ て る る possibility が strong く hint される. This year, <s:1> β5tが thymus-specific に occurrence する institutions に related て て analysis を rows った. ま ず, ル シ フ ェ ラ ー ゼ ア ッ セ イ を with い た プ ロ モ ー タ ー parsing line を い thymus specific な 発 に now necessary な プ ロ モ ー タ を ー field with constant し た. Time に beta 5 t を 発 now し て い な い cells で beta 5 t を 発 now さ せ る よ う な planning write factor を exploring し, alternate protein と し て FoxN1 を be し た. Now, cTEC cell に お い て be interstate に FoxN1 が beta 5 t の 発 now に masato and し て い る の か ど う か 検 beg in で あ る.

项目成果

Hsp90-mediated Assembly of the 26 S Proteasome Is Involved in Major Histocompatibility Complex Class I Antigen Processing*

• DOI: 10.1074/jbc.m803077200
• 发表时间: 2008-10
• 期刊: Journal of Biological Chemistry
• 影响因子: 4.8
• 作者: T. Yamano;Shusaku Mizukami;S. Murata;T. Chiba;Keiji Tanaka;H. Udono

17-DMAG ameliorates polyglutamine-mediated motor neuron degeneration through well-preserved proteasome function in a SBMA model mouse

17-DMAG 通过 SBMA 模型小鼠中保存完好的蛋白酶体功能改善多谷氨酰胺介导的运动神经元变性

• 发表时间: 2009
• 期刊: Hum. Mol. Genet. 18
• 作者: Tokui;K.;Adachi;H.;Waza;M.;Katsuno;M.;Minamiyama;M.;Doi;H.;Tanaka;K.;Hamazaki;J.;Murata;S.;Tanaka;F.;Sobue;G.
• 通讯作者: G.

Dissecting beta-ring assembly pathway of the mammalian 20S proteasome

剖析哺乳动物 20S 蛋白酶体的 β 环组装途径

• 发表时间: 2008
• 期刊: EMBO J 27
• 作者: Hirano Y;Kaneko T;Okamoto K;Bai M;Yashiroda H;Furuyama K;Kato K;Tanaka K;Murata S
• 通讯作者: Murata S

Production of positively selecting peptides by thymus-specific proteasomes

通过胸腺特异性蛋白酶体产生正选择肽

• 发表时间: 2008
• 作者: Murata;S.
• 通讯作者: S.

Assembly Pathway of the Mammalian Proteasome Base Subcomplex Is Mediated by Multiple Specific Chaperones

• DOI: 10.1016/j.cell.2009.05.008
• 发表时间: 2009-05-29
• 期刊: CELL
• 影响因子: 64.5
• 作者: Kaneko, Takeumi;Hamazaki, Jun;Murata, Shigeo
• 通讯作者: Murata, Shigeo