マラリア原虫の侵入を許す赤血球(宿主細胞側)の必要・十分条件の解明/予防と治療の手がかりを探る

阐明红细胞（宿主细胞侧）允许疟原虫侵入的充要条件/寻找预防和治疗的线索

基本信息

批准号：
15019101
负责人：
高桑雄一
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15019101/
关键词：
マラリア原虫 ATP 赤血球レクチン赤血球変形能バンド3蛋白質

项目摘要

(a)マラリア原虫の侵入を許すための赤血球膜の状態(必要条件)についての検討(a-1)「MgATPにより赤血球膜の脂質配向性が維持されることでマラリア原虫の侵不が容易になる」MgATP存在下および非存在下に調製したゴースト膜を用いて、マラリアの侵入について検討した。MgATP濃度(1mM)を保ったゴーストでは、Flippase活性を介して脂質非対称分布が維持されることで赤血球と同様の中窪み円盤形と膜安定性が保たれ原虫の進入を許した。しかし、MgATPが存在しないゴーストでは形態変化(外方突出)と膜の不安定化が見られ、原虫の侵入率は低かった。これらの事実は、赤血球に備わっている膜の性質が原虫侵入の必要条件であることを示唆している。(a-2)「レクチン(WGA)により赤血球膜の変形能が低下する(即ち膜が堅くなる)とマラリア原虫は侵入できなくなる」WGAで処理した赤血球の変形能が著しく低下していることをレーザー回折法(自作装置)で確認し、原虫の浸入について測定した。その際、原虫感染赤血球とWGA処理赤血球をそれぞれを認識する蛍光プローブを用いてFlowcytometerで定量的に算定した。その結果、WGA処理した赤血球では原虫の侵入が完全に抑制されることが明らかになった。このことから、赤血球膜が正常より堅くなると、原虫の侵入に必要な膜の変化が起こりにくいことが示唆された。なお、WGAによる変形能低下は、WGAが膜を貫通するバンド3蛋白質の糖鎖に結合することで、バンド3-アンキリン-スペクトリン間の構造変化が起こり、変形能を担うスペクトルの伸展性が低下したためと考えられた。(b)マラリア原虫からのシグナル(因子)によって引き起こされる赤血球膜の変化(十分条件)についての検討原虫から分泌される因子(EBA-175など)は侵入局所の赤血球膜の性質を変化させると考えられる。実際、原虫培養液を加えると赤血球の膜安定性は低下した。このことから培養液に含まれる原虫由来の何らかの因子によって赤血球は局所で内包陥没型変化を起こしやすくなると予想される。現在、因子の同定と膜安定性低下の機序について検討している。

（a）检查红细胞膜的状态（需求），以允许入侵疟原虫寄生虫（A-1）“ MGATP保持红细胞膜的脂质方向，从而促进疟原虫疟原虫的入侵。”我们使用在有MGATP的情况下制备的幽灵膜研究了疟疾的入侵。在维持MGATP浓度（1 mM）的幽灵中，通过Flippase活性保持脂质不对称分布，并且中等齿状的椎间盘形状和膜稳定性的保持与红细胞相似，从而允许进入原生动物。但是，在没有MGATP的幽灵中，观察到形态变化（向外突出）和膜不稳定，原生动物的浸润率很低。这些事实表明，红细胞的膜性质是原生动物侵袭的必要条件。（A-2）“当凝集素（WGA）降低红细胞膜的变形性（即，膜变硬）时，疟原虫寄生虫无法进入。”激光衍射方法（自动，用WGA处理的红细胞的变形性显着降低，并测量原生动物的入侵。目前，使用荧光探针使用荧光探针进行定量计算，该计算是使用荧光探针，该荧光探针使用原生动物感染的流血细胞和WGA造成的红细胞完全抑制了RETED prot suttosed。 WGA处理的红细胞都表明，当红细胞膜变得比正常状态更硬时，侵袭原生动物所需的膜的变化较小，因此认为WGA的变形性会降低，因为WGA会降低WGA的糖链，因为它会渗透到膜上的糖链中，并在结构上产生了3-次的频率。负责变形的频谱（b）检查由寄生虫分泌的疟原虫因子（例如EBA-175）引起的红细胞膜变化（足够的条件）被认为会改变入侵局部红细胞细胞膜的特性。实际上，加入原生动物培养物时，红细胞的膜稳定性降低。因此，可以预期，培养基中包含的原生动物的某些因素将使红细胞更有可能发生局部约束抑郁型变化。当前，我们正在研究识别因素识别和降低膜稳定性的机制。