Wntシグナル転写活性を標的としたTCF decoyによる消化器癌治療

使用针对 Wnt 信号转录活性的 TCF 诱饵治疗胃肠癌

• 批准号: 15025242
• 负责人: 門田 守人
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15025242/
• 关键词: TCF decoy; Wnt signal; β-catenin; 大腸癌

(目的)大腸癌をはじめとするヒトの癌では,APC遺伝子の異常、あるいは,β-catenin変異が起きると,β-cateninの細胞内蓄積が起き、転写因子TCFとの複合体を形成する。β-cateninによって活性化を受けたTCFは各種遺伝子promoterのTCF response elementへ結合し転写を亢進させる。興味深いことに,TCFの標的遺伝子であるc-myc,cyclin D1,PPAR-delta,MMP-7などは,癌の発生,進展に重要な役割をもつとされるものであり,β-cateninの蓄積はこれら癌関連遺伝子の発現亢進のために共通のメカニズムとなっていることが明らかとなってきた。本研究ではWnt signal活性化のkeyとなる転写因子TCFに対する'TCF decoy'を作製し,下流遺伝子の転写の特性化を阻止する。(研究予定と結果)(1)HEK293細胞に、beta-catenin遺伝子を導入したTCF活性化モデルを作製した。TCF binding element配列情報をもとに、長さの異なるTCF decoyを設計し,TCF活性を抑制するものをscreeningし,18merが最適とわかった。(2)FITC標識decoyは,約6時間でほぼ全ての細胞の核に効率よく導入され,72時間まで細胞内に留まった。(3)癌細胞についても、TCF decoy 18merを用いて同様の事象を検討した。面白いことに、HEK293細胞ではTCF活性が減少してもほとんど細胞増殖抑制効果はみられなかったが,HCT116大腸癌細胞では約50%の増殖抑制効果がみられた。他に複数の消化器癌細胞を用いて、同様の結果を得た。

Objective: Colorectal cancer is the result of abnormal APC gene expression, β-catenin differentiation,β-catenin intracellular accumulation, and TCF complex formation.β-catenin activation and TCF response element binding The expression of c-myc,cyclin D1,PPAR-delta,MMP-7 is important for cancer development and progression. β-catenin accumulation is important for cancer related gene development and hyperactivity. In this study, the key to Wnt signal activation was determined by TCF, and the characterization of downstream signal was prevented. (1) Introduction of beta-catenin gene into HEK293 cells and activation of TCF TCF binding element alignment information is different from TCF decoy design,TCF activity is suppressed from screening, and 18mer is optimal. (2)FITC labeled decoy was introduced into the nucleus of the whole cell in about 6 days and remained in the cell in 72 days. (3)Cancer cell detection, TCF decoy 18mer use in detection of the same event The TCF activity of HEK293 cells was reduced by about 50% in HCT116 colorectal cancer cells. He uses multiple digestive cancer cells, and the same results are obtained.

项目成果

関洋介, 門田守人, 他: "Wnt signalの治療への応用"現代医療. (In press).

Yosuke Seki、Morito Kadota 等人：“Wnt 信号在治疗中的应用”现代医学（正在出版）。