植物ウイルス誘導宿主RNA依存RNA複製酵素の発現動態ならびに酵素学的解析

植物病毒诱导的宿主RNA依赖性RNA复制酶的表达动态和酶学分析

• 批准号: 15028215
• 负责人: 竹下 稔
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15028215/
• 关键词: キュウリモザイクウイルス; RNA dependent RNA polymerase

キュウリhRdRP遺伝子の全塩基配列を決定し,この遺伝子はトマト,タバコ,A.thalianaの各種hRdRPと60-70%の相同性を示すことが明らかとなった.また,タバコ,ササゲhRdRP遺伝子については3'末端側約半分のcDNAクローンを取得し,塩基配列決定を行った.さらに,in situハイブリダイゼーションを始め転写レベルでのhRdRP遺伝子発現誘導動態解析を行うために,ササゲhRdRP遺伝子cDNAクローンから非放射性プローブを調製した.次に,既に精製法が確立しているタバコのhRdRPをCMV感染葉から部分純化後,CMV RNAを鋳型に用いてin vitroにおける基質の取り込み活性を測定した.その結果,CMV各系統共にタバコに対してhRdRP活性を誘導することが認められた.さらに,ウイルス感染によるササゲhRdRPの発現誘導動態ならびに植物ウイルス間の干渉効果の機構を分子レベルで解明することを目的として,異なるサブグループに属するCMVの感染性cDNAクローンを用い,ササゲ(品種 黒種三尺,PI189375)におけるウイルス間の感染増殖に関する競合について転写レベルでの解析を行った.これまでの各種接種試験の結果,ササゲの接種葉,非接種上位葉組織内におけるCMVサブグループ間の競合が明らかとなった.比較のためにタバコでも接種試験を行ったところ,同様にCMVサブグループ間の競合が示された.また,CMVとPeanut stunt virusを用いてN.benthamianaに対し同時混合接種試験ならびに干渉効果試験を行ったところ,CMVの移行増殖が優位に推移することが示され,ククモウイルス間のレベルでもウイルスの移行増殖に関する競合が生じることが判明した.ササゲにおけるCMV RNA蓄積とhRdRP発現誘導に関する動態解析を各種ハイブリダイゼーション法により行った結果,接種葉においてはCMVの増殖量に比例してhRdRP mRNAが蓄積すること,さらにウイルスが移行増殖している部位ではhRdRP遺伝子のmRNA蓄積レベルが上昇することが示唆された.これらの結果から,hRdRP遺伝子の発現誘導はウイルス増殖部位における宿主のウイルス抵抗性分子機構と何らかの因果関係を持つ可能件が示された.

All kinds of hRdRP (60-70%) are similar to each other, indicating that they are similar to each other in the whole base of the hRdRP sub-system. In the end of the hRdRP, about half of the cDNA is available, and the base column determines the row. This is the first time that in situ has been written. This is the first time that you have written the command configuration parser, which is called "hRdRP". In this case, you will be able to parse the cDNA data in a row that is not radioactive. This is not a radioactive device. For the second time, after the hRdRP infection was partially cured, the CMV RNA serotype was used to determine the activity of the in vitro infection. The results showed that the activity of hRdRP in all systems of CMV led to the increase of blood pressure. This is the first time that the hRdRP has been infected, and that it has been shown that there are no changes in the state of the disease, the plant, the plant, the fruit, the organ, the molecule, the body, the body, the body PI189375). Do you want to know if you are infected with the virus? do you want to write it? After testing the results of all kinds of tests, you can connect with each other, and if you are not in the upper group, you can use the CMV system to meet the requirements of the system. Compare with each other in order to meet the requirements of other companies, and the same as that of the CMV company. In the same time, the CMV Peanut stunt virus was used to mix the raw materials in the same time. The results showed that the transfer location of the CMV was different, and that the transfer rate of the CMV was significantly different. In order to analyze the dynamic status of various kinds of CMV RNA storage, the results of the analysis of the dynamics of various kinds of environmental protection were analyzed, and the results were analyzed in terms of the proportion of CMV production, the proportion of hRdRP mRNA storage, the transfer of colonies to colonies, the transfer of colonies, and the transfer of colonials. the mRNA storage system was used to show that it was instigated. The results showed that the hRdRP gene was used to determine the location of the colonization site, the host plant, the molecular mechanism of cause and effect resistance, and the possible evidence.

项目成果

Takeshita et al.: "Competition between wild-type virus and a reassortant from subgroups I and II of CMV and activation of antiviral responses in cowpea"Archives of Virology. In press.

Takeshita等人：“野生型病毒与CMV亚组I和II的重配体之间的竞争以及豇豆抗病毒反应的激活”病毒学档案。