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層特異的な視床皮質投射形成を担う細胞表面・細胞外マトリックス分子の解析

分析负责形成层特异性丘脑皮质投射的细胞表面和细胞外基质分子

基本信息

批准号：
15029233
负责人：
山本亘彦
金额：
$ 4.42万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

大脳皮質は6層からなる細胞構築を持ち、神経回路はこの層構造に基づいて形成される。本研究では、その回路形成を担う細胞表面分子や細胞外マトリックス分子を同定し、その形態的あるいは機能的意義を解析することを目指した。これまでに層特異的な遺伝子探索を行うための方法として、(1)サブトラクションcDNAライブラリーからの探索による解析と(2)モノクローナル抗体法を用いる探索法を並行して進めてきた。その結果、次のような結果を得た。(1)ネトリン受容体ファミリーの新規メンバーunc5h4が発達期の大脳皮質4層細胞にに特異的に発現することを昨年度に示したが、さらに大脳での領域特異性について調べたところ、視覚野や体性感覚野などの感覚性の視床から入力を受ける皮質領域の4層で強く発現することがわかった。さらにその細胞外ドメインのタンパク質を塗布した培養皿上で視床ニューロンを培養したところ,細胞体や軸索が集合する傾向にあることが見出された。(2)6C9抗体は発生期の視床-皮質問の投射経路に強い染色性を示すものであった。昨年度の研究から、この抗体が認識する抗原はT-cadherin(CD13)と呼ばれるカドヘリンファミリーに属する膜タンパクであることが判明し、また皮質下位神経核投射に関わる5層細胞や視床に特異的に発現することが明らかになった。その機能を明らかにするために、in utero electroporation法によってT-cadの過剰発現を行ったところ、皮質の細胞移動や軸索の投射軸索異常が生じた。

The cellular architecture of the large cortex is maintained in six layers, and the basal structure of the cerebral circuit is formed in six layers. The purpose of this study is to analyze the molecular and extracellular structure of cell surface and its functional significance. The method of layer-specific gene exploration is: (1) analysis of gene expression in cDNA;(2) parallel exploration of gene expression in antibody. The result of the second round was obtained. (1)The development of new receptor patterns in the cortex of the brain was observed in 5h4 cells of the cortex of the brain during the development period, and the domain-specific patterns in the cortex of the brain during the development period were observed in 5 h4 cells of the brain during the development period. In addition, the cell body and axons have a tendency to assemble on culture plates. (2) 6C9 antibody was strongly stained in the projection pathway of the bed-cortex pathway during its development. Last year's research found that the antigen recognized by this antibody is found in the membrane of T-cadherin(CD13) and the red label, and it is also clear that it is specifically found in the five layers of cells and the optic bed involved in cortical hypothalamus nuclear projection. In addition, the abnormal occurrence of T-cad, cortical cell movement and axonal projection occurs due to the abnormal occurrence of T-cad in utero electrolysis method.