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プリオンタンパク質由来フラグメントペプチドを用いたiPS細胞分化神経細胞への影響

使用朊病毒蛋白衍生片段肽对 iPS 细胞分化神经细胞的影响

基本信息

批准号：
15K17887
负责人：
小嶋絢
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Ritsumeikan University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-04-01 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

プリオンタンパク質C末端フラグメントペプチドを用いて、その凝集メカニズムへの関与、およびiPS由来神経幹細胞に対するアポトーシス誘導について検討した。特に、昨年注目したPrP175-189などに加えて、凝集性への糖鎖修飾の影響を検討するためによりC末端側の糖鎖修飾部位でもあるPrP178-202を合成し検討に用いた。このペプチドはCysを含有しておりその影響もあり合成効率は非常に悪く、精製も困難であったことから試料の調製に長期間を要した。ついで、このペプチドを用いてプロテアーゼKを用いた酵素耐性獲得による凝集メカニズムの検討を行った。これまでに合成し所有しているペプチドは少なくとも水には一定の可溶性を示していたのに対して、PrP178-202は水を加えて静置すると凝集塊とみられる不溶性固体を形成し沈殿した。調製直後のPrP178-202に銅イオン存在下と非存在下においてプロテアーゼKを添加し、酵素分解をHPLCで観察したところ銅イオン存在下にでは経時的なクロマトの変化はほとんど見られずペプチド自身の凝集性の強さを銅イオンがより増強していると考えれた。なお、添加している銅イオンの濃度ではプロテアーゼKを直接妨害しないことは昨年度に確認済みである。これらのことからプリオンタンパク質が糖鎖修飾されない場合、その凝集性の増加するという既知の報告の裏付けられる。アポトーシス誘導についての検討では、昨年と同様にA172細胞を用いてカスパーゼ３の分解を指標に行った。その結果、銅イオンの添加に関係なくアポトーシスを誘導する結果が得られた。一方で、iPS細胞由来神経幹細胞の誘導時点からペプチドを添加して神経細胞の発現においてアポトーシス誘導が起こるのかを観察しようとしたが、培地中でペプチドが凝集することや、ペプチドや銅の添加による刺激などの影響による細胞死が見られ条件検討が必要である。

This is the reason why you need to know where the iPS comes from. You know, you know, the reason for iPS. Last year, we paid attention to the addition of PrP175-189C, the modification of agglutinative sugar, the repair of C-terminal sugar, the synthesis of PrP178-202and the use of sugar. There is a significant increase in the number of compounds in the Cys. The synthesis rate is very high. The enzyme tolerance test was used to get the enzyme agglutination test. The insoluble water must be soluble, and the PrP178-202water must be added to rest, agglutinate, agglutinate and form an insoluble solid. In the presence of PrP178-202s, there are significant differences in the presence of high concentration of enzymes, such as the addition of enzymes, the presence of enzymes, the presence of enzymes, and the presence of agglutination. the results show that there is no significant difference between the two groups in terms of their own agglutination properties. This is a direct hindrance to the fact that there was a serious problem last year. Please tell me that the sugar has been modified, that the agglutination has been added, and that the known report has been paid. This is the first time to tell you that last year's A172 cell was used to decompose the word "row" in the same cell. Please check the results, and the results are satisfactory. On the one hand, the origin of the iPS cell causes the cell to change the time and time to add the cell to show that the cell is responsible for monitoring the cell death rate. In the culture, it is necessary to add the stimulus to the cell death condition.

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

ヒトプリオンタンパク質(hPrP)C-末端領域由来フラグメントペプチドの構造変化と分子間相互作用の検討

研究源自人朊病毒蛋白 (hPrP) C 末端区域的片段肽的结构变化和分子间相互作用

DOI：
发表时间：
2016
期刊：
影响因子：
0
作者：
坂口裕子;小嶋絢;豊田英尚;谷口将済;小西元美;秋澤俊史
通讯作者：
秋澤俊史

C-terminal region of the hPrP can be the core for the structual covorsiong and the aggregation

hPrP 的 C 端区域可以成为结构共蚀和聚集的核心

DOI：
发表时间：
2015
期刊：
影响因子：
0
作者：
Aya Kojima;Yuko Sakaguchi;Hidenao Toyoda;Masanari Taniguchi;Motomi Konishi;Toshifumi Akizawa
通讯作者：
Toshifumi Akizawa

C-terminal Region of the hPrP Can Be the Core for the StructuralConversion and Aggregation

hPrP 的 C 端区域可以成为结构转换和聚集的核心

DOI：
发表时间：
2016
期刊：
Peptide Science 2015
影响因子：
0
作者：
Aya Kojima;Yuko Sakaguchi;Hidenao Toyoda;Masanari Taniguchi;Motomi Konishi and Toshifumi Akizawa
通讯作者：
Motomi Konishi and Toshifumi Akizawa

ヒトプリオンタンパク質由来フラグメントペプチドの SH-SY5Y 細胞への影響

人朊病毒蛋白片段肽对SH-SY5Y细胞的影响