哺乳類Rif1蛋白質によるDNA複製、転写、組換え、修復の連動的制御機構の解析

哺乳动物Rif1蛋白DNA复制、转录、重组和修复的连锁控制机制分析

• 批准号: 15K18537
• 负责人: 山崎 聡志
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15K18537/
• 关键词: DNA複製; Rif1; Cdc7; 発生分化

哺乳類Rif1タンパクの機能は、DNA修復、DNA複製タイミング制御、遺伝子発現制御などが多岐に渡る。本研究ではRif1と関連因子であるCdc7について解析を行った。Rif1は核骨格に強く結合しており、染色体核内構造を維持している。そのため、Rif1欠損により不活性型X染色体の核内配置に影響が生じると考えられた。そこで、雌由来の野生型T細胞およびRif1欠損T細胞を使用して活性型X染色体と不活性型X染色体の核内配置をFISHにて解析した。その結果、予想とは異なり著しい変化は観察されなかった。よって、Rif1は染色体全体ではなく、局所領域の染色体構造を制御していると思われる。次に、DNA複製に必須なリン酸化酵素であるCdc7とRif1との関係について解析を行った。Cdc7単独欠損MEF細胞ではDNA複製が行われず、細胞周期S期の停止が観察された。一方、Cdc7 / Rif1二重欠損MEF細胞では、S期停止が解除され細胞周期が進行すると同時にDNA複製能も回復した。この事実は分裂酵母で得られた知見と一致しており、恐らく酵母から動物細胞まで共通の性質であると考えられる。次に脳特異的 Cdc7 欠損マウスの解析を行い、分化過程におけるCdc7の役割について解析を行った。生後直後のCdc7欠損マウスでは、脳の層構造形成の異常が観察され、成長と共に行動異常や脳の萎縮などが観察された。一方、血球特異的にCdc7を欠損させたT細胞では、見かけ上著しい変化は観察されなかった。以上の事から、Cdc7欠損によりES細胞やMEF細胞は複製の異常が生じるが、ある特定の組織あるいは遺伝的背景の細胞では、Cdc7非存在化でもDNA複製を行う方法を持っている可能性が示唆された。

Mammalian Rif1 equipment, DNA repair, DNA replication, control and control of genetic diversity. In this study, Rif1 factors were analyzed, Cdc7 factors were analyzed, and row data were analyzed. The Rif1 nuclei were strongly bound to the nuclei of chromosomes and the nuclei of chromosomes were maintained. Rif1 deficiency, inactive X chromosome, intranucleus configuration, inactivation, intranuclear configuration, inactivation, inactivation, in The wild type T cell, the Rif1 deficient T cell, the active X chromosome, the inactive X chromosome, the inactive X chromosome, the FISH chromosome, the inactive X chromosome, the wild type T cell, the wild type T cell, the inactive X cell, the inactive X chromosome, the inactive X chromosome. After reviewing the results, I would like to make a thorough observation of the results. The whole body of chromosomes in Rif1 and the local field are responsible for the production of chromosomes and control the formation of chromosomes. For secondary and DNA replication, the acidifying enzyme must be used to analyze the Cdc7, Rif1, and parse lines. Cdc7 is responsible for the failure of MEF cells, DNA replication, cell cycle S, and cell cycle monitoring. One party, Cdc7

项目成果

動物細胞のDNA複製、発生、分化におけるCdc7キナーゼとRif1タンパクの機能

Cdc7激酶和Rif1蛋白在动物细胞DNA复制、发育和分化中的功能

• 发表时间: 2015
• 作者: 山崎聡志;小野富男;松嶋夢叶;篠田陽;森山賢治;吉沢直子;今西美知子;古市貞一;正井久雄
• 通讯作者: 正井久雄

Roles of Rif1 in regulation of DNA replication, transcription and DNA repair

Rif1 在 DNA 复制、转录和 DNA 修复调节中的作用

• 发表时间: 2015
• 作者: Satoshi Yamazaki;Jiao Sima;Yumeka Matsushima;Kenji Moriyama;Naoko Yoshizawa;Sara Buonomo;David M Gilbert;Hisao Masai
• 通讯作者: Hisao Masai

東京都医学総合研究所 ゲノム医科学研究分野 ゲノム動態プロジェクト

东京都医学科学研究所基因组医学科学系基因组动力学项目