尿管芽の発生モデル構築と分化誘導への応用

输尿管芽发育模型的构建及其在分化诱导中的应用

• 批准号: 15K19458
• 负责人: 太口 敦博
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-01 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15K19458/
• 关键词: 腎臓再生; 細胞系譜; 成長因子; 尿管芽

本研究計画で誘導目標としていた尿管芽細胞およびその前駆細胞のマーカー遺伝子を、遺伝子改変マウスを用いて実施したマイクロアレイ解析により抽出した。さらにこのアレイデータを用いて、尿管芽発生の後期課程の分化に必要と考えられる候補因子を抽出した。次に、実際にマウス胎仔の尿管芽前駆細胞をインビトロで候補因子の存在下に培養し、同定したマーカー遺伝子の発現変化を定量的に解析することにより、尿管芽の前駆細胞の分化誘導に必要となる因子の濃度と組み合わせを決定した。この実験系によって尿管芽の後期発生過程である、胎生8.5日目の中間中胚葉から胎生10.5日目の尿管芽までの成熟分化に必要な因子が確定できた。さらに、この胎生8.5日目の胎仔中間中胚葉から誘導した尿管芽細胞を後腎間葉との共培養アッセイによって機能評価を行い、実際に胎仔本来の尿管芽と同様に分岐形成能を保持していることを確認した。また、この誘導尿管芽は後腎間葉に含まれるネフロン前駆細胞を維持する能力と分化させる能力を有しており、尿管芽と後腎間葉における双方の幹細胞を互いに維持するという特性も確認することができた。続いて、マウスES細胞から胎生8.5日目の胎仔中間中胚葉相当の細胞を分化誘導しうる条件の検討を開始した。これまでに既に確立している後腎間葉細胞の分化誘導プロトコルを参考に、尿管芽系譜に合わせて一部改変しながら誘導条件の最適化を進めている。

This research project で induced target と し て い た urine tube buds cell お よ び そ の 駆 cells before の マ ー カ ー heritage 伝 を, heritage 伝 child change - マ ウ ス を with い て be applied し た マ イ ク ロ ア レ イ parsing に よ り spare し た. さ ら に こ の ア レ イ デ ー タ を with い て, urine tube buds 発 の late course の differentiation に と necessary test え ら れ る alternate factor を spare し た. に, be interstate に マ ウ ス tire tsai の urine tube shoots before 駆 cells を イ ン ビ ト ロ で に し, in the presence of alternate factor の with fixed し た マ ー カ ー posthumous son 伝 の 発 now - the を quantitative analytical す に る こ と に よ り, urine tube shoots の 駆 cell differentiation inducing に necessary before の と な る concentration factor の と group み close わ せ を decided し た. こ の be 験 department に よ っ て urine tube shoots born late の 発 process で あ る, viviparous 8.5 day eye の middle mesoderm か ら viviparous 10.5 day eye の urine tube shoots ま で の mature differentiated に が な factors determine necessary で き た. さ ら に, こ の viviparous mesh の tire 8.5 days wang middle mesoderm か ら induced し た urine tube after bud cells を renal mesenchymal と の trained ア ッ セ イ に よ っ て function evaluation 価 を い, be interstate に tire tsai originally の urine tube shoots と with others に gaps formed can keep し を て い る こ と を confirm し た. ま た, こ の catheter buds lure は after renal mesenchymal に containing ま れ る ネ フ ロ ン を 駆 cells before す る ability と differentiation さ せ る を power し て お り, urine tube shoots と after renal mesenchymal に お け る の stem cells both を mutual い に maintain す る と い う features も confirm す る こ と が で き た. 続 い て, マ ウ ス ES cells か ら viviparous mesh の tire 8.5 days wang middle mesoderm quite を の cell differentiation inducing し う る conditions の を 検 please start し た. こ れ ま で に に already established し て い る after renal mesenchymal differentiation inducing プ の ロ ト コ ル を reference に, urine tube buds pedigree に わ せ て a change - し な が の ら induction conditions optimization を into め て い る.

项目成果

細胞自律的かつ相互依存的な腎臓の形態形成過程の再現と応用への課題

复制和应用细胞自主且相互依赖的肾脏形态发生过程的挑战

• 发表时间: 2016
• 作者: 太口敦博;西中村隆一
• 通讯作者: 西中村隆一

A constructive approach for dissecting kidney morphogenesis and glomerular vascularization

解剖肾脏形态发生和肾小球血管化的建设性方法

• 发表时间: 2015
• 作者: Atsuhiro Taguchi;Ryuichi Nishinakamura
• 通讯作者: Ryuichi Nishinakamura

Dissecting the early kidney specification processes by utilizing in vivo lineage tracing and ex vivo directed differentiation approach.

利用体内谱系追踪和离体定向分化方法剖析早期肾脏规范过程。

• 发表时间: 2015
• 作者: Atsuhiro Taguchi;Ryuichi Nishinakamura
• 通讯作者: Ryuichi Nishinakamura