マウスを用いTRPA1イオンチャネルに着目した脈絡膜血管新生の新規治療戦略の確立

利用小鼠建立以 TRPA1 离子通道为重点的脉络膜新生血管治疗新策略

• 批准号: 15K20278
• 负责人: 臼井 恵子
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Wakayama Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-01 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15K20278/
• 关键词: TRPA1; algon laser induced CNV; 脈絡膜新生血管; 角膜新生血管

TRPA1は感覚神経細胞に主に発現するCa2+イオンチャネルである。本研究では、TRPA1欠失マウスでのレーザー誘発実験的脈絡膜血管新生(CNV)の形成を軽減させることが出来るか否かを検討した。TRPA1欠失はレーザー誘発CNVを優位に抑制し、その際、TRPA1陽性細胞は血管内皮細胞と共発現はしないが近接に発現していた。炎症細胞浸潤を評価するため、TRPA1遺伝子欠失がF4/80陽性細胞におけるVEGF、TGFβ1mRNA発現レベルに影響するかを調べたが、これらはTRPA1に影響されなかった。レーザー照射後の脈絡膜組織からRNAを抽出し、TGFβ-1、MPO、VEGF、F4/80などについてRT-PCRを行ったが、TRPA1欠失はTGFβ-1、MPOの抑制は認めたがその他は差を認めなかった。脈絡膜への炎症細胞浸潤は、VEGFおよびTGFβ-1を含む血管新生増殖因子供給源の１つであると考えられる。今後は血管内皮細胞やマクロファージ特異的なコンディショナル欠失マウスを作成し、レーザー誘発CNV実験を予定してる。血管新生反応は、ERK1/2MAPKおよびAktシグナルを介している。培養ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)を用いた検討では、いずれの経路もTRPA1作動薬、拮抗薬に影響されなかった。このため我々は血管内皮細胞に隣接するTRPA1陽性細胞の活性化が血管内皮のVEGFRを活性化しCNV形成を誘導すると仮定し、TRPA1を発現し、かつ血管内皮と近接することから繊維芽細胞に着目し、HUVECと繊維芽細胞の共培養系を用いて検討を行った。結果、TRPA1遮断がHUVECによる新生血管作用を抑制した。TRPA1拮抗薬によるHUVEC管腔形成の阻害は、線維芽細胞層に存在するTRPA1機能の遮断によるものと考えられた。以上から、TRPA1シグナル制御によりCNVを抑制できる可能性がある。

TRPA1 <s:1> sensory 覚 neural cells に are mainly に active するCa2+ <s:1> <s:1> チャネ チャネ である である である である This study で は, loss TRPA1 was owe マ ウ ス で の レ ー ザ ー 発 lure be 験 of choroid neovascularization (CNV) の form を 軽 minus さ せ る こ と が out る か no か を beg し 検 た. TRPA1 was lost owe は レ ー ザ ー 発 lure CNV を optimal に inhibit し, そ の interstate, TRPA1 was positive cells は と vascular endothelial cells were 発 now は し な い が nearly meet に 発 now し て い た. Inflammatory cells infiltration を review 価 す る た め, TRPA1 was heritage 伝 lost son owe が F4/80 positive cells に お け る VEGF, TGF beta 1 mrna 発 now レ ベ ル に influence す る か を adjustable べ た が, こ れ ら は TRPA1 was に influence さ れ な か っ た. レ ー ザ ー after irradiation の choroid tissue か ら RNA を spare し, TGF beta 1, MPO, VEGF, F4/80 な ど に つ い を line っ て RT - PCR た が, loss TRPA1 was owe は TGF beta 1, MPO の inhibit は め た が そ の he poor は を め な か っ た. Choroid へ の inflammatory cells infiltrating は, VEGF お よ び TGF beta 1 contains を む angiogenic factor supply source rights colonization の 1 つ で あ る と exam え ら れ る. Future は endothelial cells や マ ク ロ フ ァ ー ジ specific な コ ン デ ィ シ ョ ナ ル owe lost マ ウ ス を し, consummate レ ー ザ ー 発 lure CNV be 験 を designated し て る. Angiogenesis reverse 応, ERK1/2MAPKおよびAktシグナ を を and <s:1> て る る る. Cultivate ヒ ト umbilical 帯 vein endothelial cells (HUVEC) を い た beg で 検 は, い ず れ の 経 road も TRPA1 was actuation 薬, antagonism 薬 に influence さ れ な か っ た. こ の た め I 々 は endothelial cells に 隣 meet す る TRPA1 was positive cells の activeness が endothelial の VEGFR を activeness し CNV formation を induced す る と 仮 し, TRPA1 was を 発 し, か つ endothelial と nearly meet す る こ と か ら 繊 d に mesh し, bud cells HUVEC と 繊 d の bud cells co-culture system を with い て beg を 検 Line った. As a result, TRPA1 blocks がHUVECによる and inhibits を た. TRPA1 was antagonism 薬 に よ る HUVEC lumen formed の に は, line d bud cells layer exist す る TRPA1 was function の interrupt に よ る も の と exam え ら れ た. The above ら ら and TRPA1シグナ シグナ control によ CNVを inhibits the possibility of で る る がある.

项目成果

培養ヒト臍帯静脈血管内皮細胞における血管新生と線維化へのTRPA1の関与

TRPA1参与培养人脐静脉内皮细胞的血管生成和纤维化

• 发表时间: 2017
• 作者: Usui-Kusumoto K;Iwanishi H;Ichikawa K;Okada Y;Sumioka T;Miyajima M;Liu CY;Reinach PS;Saika S.;楠本 恵子
• 通讯作者: 楠本 恵子

マウス角膜血管新生におけるTRPA1イオンチャネル受容体の役割

TRPA1离子通道受体在小鼠角膜血管生成中的作用

• 发表时间: 2015
• 作者: 原賀順子;春間朋子;西田傑;中村圭一郎;平松祐司;Keiko Kusumoto;春間朋子ら;楠本恵子
• 通讯作者: 楠本恵子

Roles of TRPA1 cation channel receptor signal in development of stromal neovascularization in a mouse cornea

TRPA1阳离子通道受体信号在小鼠角膜基质新生血管形成中的作用

• 发表时间: 2015
• 作者: 原賀順子;春間朋子;西田傑;中村圭一郎;平松祐司;Keiko Kusumoto
• 通讯作者: Keiko Kusumoto