両生類モデルを用いた環境応答に連鎖する造血制御機構の研究

使用两栖动物模型研究与环境反应相关的造血控制机制

• 批准号: 16K18554
• 负责人: 谷崎 祐太
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Waseda University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-01 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16K18554/
• 关键词: 造血; 脂肪髄; 環境応答; 造血幹細胞; アフリカツメガエル; 生理学; 細胞・組織; ストレス; 蛋白質

＜目的＞アフリカツメガエルの造血は主に肝臓で行われ、骨髄は脂肪で満たされているが、低温（5度）刺激により脂肪髄における造血が誘導される。本モデルは従来のモデル動物はで解析が困難であった「温度と造血、脂肪髄での造血」といった課題に対して有用だと考えられる。本研究では造血幹/前駆細胞を指標とし、低温時における造血関連分子の変化を明らかにする。＜研究成果＞1.造血の指標として未同定であったツメガエル造血幹/前駆細胞の検出系を確立した。作出したツメガエルMplモノクローナル抗体および血小板に相当する細胞である有核の栓球を認識するモノクローナル抗体（T12）を組み合わせ、フローサイトメトリー法により細胞を分画した。その結果、Mpl+T12-細胞の大きさを示す前方散乱光（FSC）の小さい画分を分取すると形態的に未熟な細胞が濃縮された。本細胞の多分化能および生着能をコロニーアッセイ、移植実験によりそれぞれ確認した。よって、Mpl+T12-FSClow細胞には高度に造血幹/前駆細胞が濃縮されることが明らかとなった。2.低温刺激により骨髄中の造血幹/前駆細胞が増殖することを示した。Mpl+T12-FSClow細胞数は低温刺激により骨髄でのみ優位に増加した。さらに、造血幹細胞の増殖因子であるTPOの骨髄内での発現量が増加していることを確認した。3.低温刺激により骨髄細胞が増殖することが示唆された。マイクロCTによる骨髄環境の変化を解析すると低温刺激により骨環境が変化していく所見を得た。低温暴露に伴う組織、および骨形成関連遺伝子の発現量の変化を解析したところ、低温刺激により骨細胞の分化能が増加することが示唆された。

<aper>爪蟾造血主要在肝脏中进行，骨髓充满脂肪，但低温（5度）刺激会诱导脂肪pyel中的造血。该模型被认为对脂肪虫病中“温度，造血和造血剂的挑战”很有用，这些挑战在常规动物模型中很难分析。在这项研究中，造血干/祖细胞用作阐明造血相关分子在低温下的变化的指标。 <研究结果> 1。建立了尚未确定为造血剂指标的Xenopus造血干/祖细胞的检测系统。产生的爪蟾MPL单克隆抗体和单克隆抗体（T12）识别成核的血小板细胞（与血小板相对应的细胞），并通过流式细胞仪分馏。结果，收集了MPL+T12细胞的大小，并浓缩了形态不成熟的细胞。细胞的多能和植入分别通过菌落测定和植入实验证实。因此，发现MPL+T12-FSCLOW细胞高度浓缩造血茎/祖细胞。 2。结果表明，由于冷刺激，骨髓中的造血茎/祖细胞扩散。 MPL+T12-FSCLOW细胞的数量仅在冷冻病引起的骨髓中主要增加。此外，已经证实，骨髓中TPO的表达水平是造血干细胞的生长因子。 3。建议冷刺激会导致骨髓细胞增殖。当我们分析由Microct引起的骨髓环境的变化时，我们发现骨环境由于低温刺激而变化。分析与冷暴露相关的组织表达水平和与骨形成相关的基因的变化表明，低温刺激会增加骨细胞的分化潜力。

项目成果

Analysis of interaction between thrombocytes and endothelial cells during cold-exposure in Xenopus laevis

非洲爪蟾冷暴露过程中血小板与内皮细胞相互作用的分析

• 发表时间: 2016
• 作者: Ayaka Murase;Haruka Ninao;Atsuko Watarai;Yuta Tanizaki;Takashi Kato
• 通讯作者: Takashi Kato

低温によるアフリカツメガエルタンパク質発現の変化―データベース間の比較を交えて―

低温引起的非洲爪蟾蛋白表达变化——数据库间比较——

• 发表时间: 2017
• 作者: 佐藤圭，村瀬絢香;永澤和道,，谷崎祐太，加藤尚志
• 通讯作者: 永澤和道,，谷崎祐太，加藤尚志

アフリカツメガエルにおけるスロポチン同祖遺伝子の発現比較解析

爪蟾中斯洛泊汀同源基因的比较表达分析

• 发表时间: 2016
• 作者: 佐藤圭，村瀬絢香;永澤和道,，谷崎祐太，加藤尚志;加藤康太，佐藤圭，相曾卓樹，谷崎祐太，加藤尚志
• 通讯作者: 加藤康太，佐藤圭，相曾卓樹，谷崎祐太，加藤尚志

Enrichment of hematopoietic progenitors from liver and fatty marrow in X. laevis

非洲虎肝脏和脂肪骨髓造血祖细胞的富集

• 发表时间: 2016
• 作者: Kei Sato;Azusa Uehara;Yuta Tanizaki;Takashi Kato;谷崎祐太，望月瑶子，相曾卓樹，加藤尚志;蜷尾はるか，西村智，坂田飛鳥，村瀬絢香，谷崎祐太，加藤尚志;佐藤圭，平田昭人，加藤康太，谷合正光，谷崎祐太，加藤尚志
• 通讯作者: 佐藤圭，平田昭人，加藤康太，谷合正光，谷崎祐太，加藤尚志

A comparative perspective on erythropoiesis

红细胞生成的比较视角

• DOI: 10.11406/rinketsu.57.925
• 发表时间: 2016
• 期刊: Rinsho Ketsueki
• 作者: 加藤尚志;前川峻;永澤和;奥井武仁;谷崎祐太
• 通讯作者: 谷崎祐太