食道扁平上皮癌に対する変異p53機能回復薬の治療効果およびメカニズムの検討

突变型p53功能恢复药物治疗食管鳞癌的疗效及机制探讨

• 批准号: 16K19923
• 负责人: 古川 陽菜
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-01 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16K19923/
• 关键词: 食道扁平上皮癌; p53; 変異p53機能回復薬; アポトーシス

食道扁平上皮癌では癌抑制遺伝子p53の変異頻度が極めて高く，p53変異の有無は腫瘍の悪性度および予後不良因子と言われている．今回，変異p53の機能回復により腫瘍増殖を抑制する変異p53機能回復薬に着目し，食道扁平上皮癌に対する有効性およびメカニズムについて検証した．食道扁平上皮癌細胞株パネル11株におけるp53の変異statusをsanger sequence法にて同定し，p53機能回復薬PRIMA-1単独投与において細胞増殖解析（MTT assay），Apoptosis assayを行い抗腫瘍効果について検討した．PRIMA-1投与で，p53 missence変異株において抗腫瘍効果を示し，Apoptosisが誘導された．またmRNAレベルでp53下流遺伝子の転写活性化を認め，蛋白レベルでNOXAの発現が上昇し，NOXAを介したApoptosis誘導が示唆された．NOXAのノックダウン実験から，PRIMA-1は主にNOXAを介したApoptosisを誘導することを明らかにした．一方，p53野生株およびp53 nonsense, frameshift株では，Apoptosisは誘導されず抗腫瘍効果も乏しく，PRIMA-1の治療効果は認められなかった．食道扁平上皮癌missense変異細胞株のXenograft mouseにおいて，control群と比較してPRIMA-1投与群で有意な腫瘍増殖抑制が認められ，p53下流遺伝子の発現においてもin vitroを反映した結果を得られた．研究者の異動に伴い本研究は終了となる。

Esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) is characterized by a high frequency of p53 expression, a high level of p53 expression, and a high degree of tumor differentiation. This time, we have found evidence that abnormal p53 functional recovery drugs can inhibit tumor growth and have an effective effect on esophageal squamous cell carcinoma. The differential status of p53 in esophageal squamous cell carcinoma cell lines was determined by sanger sequence assay.PRIMA-1 alone was administered to 11 esophageal squamous cell carcinoma cell lines. MTT assay and Apoptosis assay were performed. PRIMA-1 alone was administered to 11 esophageal squamous cell carcinoma cell lines. p53 miss variant was administered to 11 esophageal squamous cell carcinoma cell lines. The mRNA expression of p53 down-stream protein was activated, protein expression of NOXA was increased, NOXA was induced by Apoptosis, PRIMA-1 was induced by NOXA. One side, p53 wild strain and p53 nonsense, frameshift strain, Apotosis induced by PRIMA-1 treatment of anti-tumor effect, anti-tumor effect. Comparison of control group and PRIMA-1 group in Xenoblast mouse of esophageal squamous cell carcinoma missense variant cell line. The change of investigator is accompanied by the termination of this study.