歯原性上皮細胞におけるNGF-p75シグナルによる細胞増殖制御機構の解明

阐明牙源性上皮细胞中 NGF-p75 信号的细胞增殖控制机制

• 批准号: 16K20633
• 负责人: 小野 真理子
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-01 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16K20633/
• 关键词: 歯原性上皮細胞; 神経栄養因子; 神経成長因子; NGF

我々はこれまで、歯原性上皮細胞において、神経栄養因子のうちNGFがその低親和性受容体p75を介し細胞増殖シグナルを伝達していることを明らかにしてきた。このシグナル伝達機構の詳細な解析を行うために、まず完全長p75(pEF1/p75)およびp75細胞内ドメインを欠失させた発現ベクター(pEF1/p75-ΔICD)を作製、歯原性上皮細胞株（SF2細胞）に遺伝子導入を行った。これらの過剰発現細胞おいてそれぞれの細胞増殖を比較したところ、完全長p75過剰発現細胞においては有意に細胞増殖が誘導された。一方でp75-ΔICD過剰発現細胞では細胞増殖促進はみられなかった。次に、NGFのp75下流でのシグナル伝達経路について解析を行った。ウェスタンブロット法による解析の結果、ERK1/2のリン酸化が強く認められた。これより、SF2細胞にERK1/2の上流分子であるMEKの阻害剤U0126による処理を行い、増殖に与える影響を検討したところ、阻害剤の濃度依存的にNGFによる細胞増殖が抑制された。以上の結果より、NGFはp75に結合し、その下流においてERK1/2をリン酸化することによる歯原性上皮細胞の増殖シグナルを伝達していることが示唆された。これまで、歯原性上皮細胞においては、NGFと同じ神経栄養因子ファミリーに属するNT-4が高親和性受容体TrkBに結合後、その下流でERK1/2をリン酸化し細胞の分化を促進することが明らかとなっている。こちらのシグナルとの比較および細胞動態に与える影響、またNGF-p75-ERK1/2のシグナル経路のさらに詳細な解析を進めているところである。

The expression of NGF and p75, a low-affinity receptor for cytogenetic factors, was detected in human epithelial cells. The detailed analysis of the mechanism of this gene expression was carried out in vitro, and the complete p75(pEF1/p75) and p75 intracellular genes were detected in vitro. The cell proliferation induced by p75 was compared with that induced by p75. A p75-ΔICD is found in cells that promote cell proliferation. The next step is to analyze NGF downstream from p75. ERK1/2 and ERK 2 are the most important components of ERK. ERK1/2 up-stream molecules in SF2 cells were inhibited by MEK inhibitor U0126. The above results indicate that NGF p75 binds to and downstream ERK1/2, which is responsible for the proliferation of primary epithelial cells. In addition, NGF and NT-4 bind to the high affinity receptor TrkB, and ERK1/2 regulates the differentiation of these cells. Comparison of cell dynamics and effects of NGF-p75-ERK1/2 on cell dynamics