交互積層法を用いた機能的血管化肝組織の構築

逐层法构建功能性血管化肝组织

• 批准号: 17K16506
• 负责人: 佐々木 一樹
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-01 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17K16506/
• 关键词: 血管化三次元肝組織; 交互積層法; 初代肝細胞; 臓器再生

平成29年度は、ヒトiPS由来肝細胞やヒト初代肝細胞を用いて血管化三次元肝組織の構築に取り組んだ。ヒトiPS由来肝細胞を用いた検討においては、交互積層による細胞コートを施すため、シート状に分化誘導されたヒトiPS由来肝細胞を、アクターゼを用いて単一細胞に分離した。その後、交互積層法を用いて、血管化三次元肝組織の構築は可能であったが、アルブミン産生能は、単一細胞にした時点で、劇的に低下することが分かった。したがって、肝細胞の機能を維持するには、培養容器からの単一細胞の調整・回収方法の検討、または、シート状のまま積層体を構築するなどの工夫が必要と考えられた。初代肝細胞を用いた検討においては、肝細胞の分離法について検討した。まず、予備検討として、ラット肝からのコラゲナーゼ処理により肝細胞分離を試みた。次に、ヒト初代肝細胞については、倫理委員会の承認に基づき、ヒト切除肝から肝組織片を採取し、コラゲナーゼ処理によりヒト肝細胞を分離した。分離されたヒト肝細胞に対し、交互積層法による細胞コート法を施し、ヒト線維芽細胞、血管内皮細胞を用いて、血管化三次元肝組織の構築は可能であった。機能面では、アルブミン産生は確認されたが、時間経過で著しく低下することが分かった。今後、肝障害モデル動物に対する組織片による治療効果等の実験に進む際には、肝細胞の機能を維持するべく、組織構築から移植までのタイミングや、移植部位（皮膚や肝表面）などの検討が必要と考えられた。

In Pingcheng 29, the primary liver cells were harvested from the primary liver cells by vascularization ternary liver tissue iPS. The etiology of iPS was induced by cell differentiation, and isolation of iPS, respectively. After the treatment, the three-dimensional liver tissue tissue culture was used to determine the temperature, the energy generation, the time point and the low temperature of the liver tissue. It is necessary to use the machine to maintain the temperature and culture of the container. The method is to improve the quality of the body. The primary liver cells were divided into two groups, and the liver cells were divided into two groups. Please do not know if you are going to make an attempt to separate cells from the liver. In the second and third generation of the liver, the committee of the committee will confirm that the cells of the primary liver are isolated from each other, and the liver cells of the primary liver tissue are separated from each other. It is possible to separate the cells of the liver and the cells of the liver, to use the method of cell culture, to maintain the germ cells, to use the endothelial cells of blood vessels, and to vascularize the three-dimensional liver tissue. It is possible for the students to confirm that the train is running, and that the time is over time to check the distribution of the car. In the future, the animal tissue of the patients with liver failure, the results of the treatment and other laboratory tests, the mechanism of the liver cell to maintain the liver injury, the tissue tissue to transplant the liver tissue, and the transplant site (the surface of the liver) must be tested.