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歯根膜恒常性維持における転写因子Mkxの機能解明

阐明转录因子Mkx在维持牙周膜稳态中的功能

基本信息

批准号：
17K17313
负责人：
幸田直己
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Tokyo Medical and Dental University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2017
资助国家：
日本
起止时间：
2017-04-01 至 2019-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17K17313/
关键词：
Mkx Mohawk homeobox PDL 歯根膜 Mohawk 歯科矯正学転写因子

项目摘要

今年度は下記の実験を予定していた。1. 週齢によるMkx発現量の変化…4週、10週、6か月および12か月齢において野生型マウスを用いて歯根膜のMkx発現量を比較検討。6か月齢以上のマウスに関しては予備実験で安定した結果を得ている凍結粉砕の手法を用いてRNA抽出を行う。マウスの加齢 (に伴う歯根膜の成熟) とMkx発現量の相関関係から近似曲線を作成し、欠損マウスの加齢に伴う表現型発症の理解の一助とする。その後、Mkxのヒトへの応用を見据え、Mkx欠損ラットを用いて矯正力を歯に加える実験を本実験として行う。2. Mkxと関連遺伝子発現の局在比較…Mkxとの関連が疑われる候補遺伝子について、Mkx欠損マウスの歯根膜の免疫多重染色にてMkxと関連遺伝子各々の発現局在を比較する。Mkx欠損マウスにおけるMkx発現部位の確認は抗GFP抗体を用いて検討 (欠損マウスはMkx遺伝子にGFPをノックインしてMkxの機能を喪失させている)。3. Mkx欠損ラットを用いた矯正学的歯の移動実験…8週齢の野生型およびMkx欠損ラットの前歯と第一臼歯を矯正用コイルを用いて互いに牽引するように口腔内に接着し両群ラットの歯の移動距離を経日的に14日目まで観察。その後屠殺を行いμCTにて歯の移動様相を解析。組織学的観察および免疫染色による遺伝子発現変動も確認する。しかしながら、３の実験の予備実験の段階で、ラットの歯の組織学的解析の手法が難しく、時間を要してしまった。また研究代表者の病院退職に伴い、今後の実験の継続が難しくなった。

For this year, the following た is recorded by を and determined by てたたた. 1. Weekly 齢によるMkx occurrence quantity <s:1> change... 4 weeks, 10 weeks, 6 months および12 months 齢におてててて wild type ウスをウスを using <s:1> て歯 root membrane <s:1> Mkx occurrence amount を comparison 検. More than 6 か齢のマウスに masato しては reserve be 験で settle した results てをいる frozen powder 砕の gimmick を with いて RNA extraction うを line. マウスの plus 齢 (に with う歯 membrane の mature) と Mkx 発 amount is の phase masato masato is から approximate curve を made し, owe damage マウスの plus 齢に発 disease phenotypes with うの understand の on help とする. After その, Mkx のヒトへの応を see according to え, Mkx owe loss ラットを with いて orthodontic force を歯に plus える be 験を this be 験としうて line. 2. Mkxと is related to 伝. The current situation is being compared... Mkx との masato even が suspected われる alternate heritage 伝 son について, Mkx owe damage マウスの歯 root membrane の immune multiple dyeing にて Mkx と masato even heritage 伝 child each 々の発 the present situation in をする. Mkx owe loss マウスにおける Mkx 発 now parts の confirm は GFP antibody を resistance with いて検 please (owe loss マウスは Mkx posthumous son 伝に GFP をノックインして Mkx の loss function をさせている). 3. Mkx deficiency ラットを use the 歯 of ラットを orthodontics to move the device... Eight weeks 齢の wild-type および Mkx owe loss ラットの before 歯と first mortar 歯を correction with コイルを with いて mutual いに traction するようにに in oral cavity and then し struck group ラットの歯の mobile distance を経 day 14 に mesh まで観 was found. Youdaoplaceholder0 そ followed by massacre を followed by <s:1> μCTにて歯 <s:1> movement sample を analysis. Histological 観 examination および immunostaining による results showed changes in 伝 and 観 confirmed する. しかしながら, 3 の be 験の reserve be 験の Duan Jie で, ラットの歯の histologic analysis の gimmick が difficult しく, time をしてしまった. The representative of the また research <s:1> retired from the hospital に accompanied by に, and in the future, it will be difficult for the <s:1> practical experience 継続が to participate in くなった.