歯の発生における上皮間葉相互作用でのCa2+応答の役割とエナメル芽細胞の分化

Ca2+ 反应在牙齿发育中上皮间质相互作用和成釉细胞分化中的作用

• 批准号: 17K17337
• 负责人: 村田 佳織
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Health Sciences University of Hokkaido
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-01 至 2021-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17K17337/
• 关键词: 歯原性上皮細胞; 歯髄幹細胞; カルシウム応答; イメージング; 歯の発生; マイグレーション; SOCE; 歯原性上皮; 薬理学

本研究は、歯の発生過程におけるCa2+シグナルの役割を明らかにすることを目的に計画された。発生過程では、細胞増殖やマイグレーションによる形態形成と、細胞間相互作用による細胞分化が重要である。本研究では、ラット歯原性上皮細胞（SF2）とヒト歯髄幹細胞（DPSC）に異なる蛍光を発するCa2+センサーを発現させ、長時間ライブセルイメージングの実験系を確立した。この実験系を用いて、SF2細胞やDPSCにおいて自発的で間歇的なCa2+応答が起こることや、これらの共培養によってCa2+応答のパターンが変化することが明らかになった。SF2細胞のマイグレーションを定量的に解析すると、ストア作動性Ca2+流入機構をLa3+によって抑制するとマイグレーションが抑制されることが明らかになった。このことより、SF2細胞のマイグレーションでは、Ca2+シグナルが重要な役割を担うことが示唆された。また阻害剤を用いた解析から、SF2細胞のCa2+応答におけるP2Y受容体と受容体チロシンキナーゼの関与が明らかになった。このことから、受容体チロシンキナーゼによるマイグレーションの促進が、ATP放出の促進を介してCa2+応答を起こした可能性が考えられた。SF2とDPSCの共培養によってDPSCの自発的Ca2+応答が増加することが明らかになった。このDPSCのCa2+応答にも受容体チロシンキナーゼが関与していた。受容体チロシンキナーゼは、DPSC単独培養でおこるCa2+応答にはあまり関与していないことから、SF2から放出される因子によってDPSCの反応が変化したと考えられた。網羅的遺伝子解析とRT-PCRの結果から、共培養によってDPSCにおけるTGFβ3の遺伝子発現が増加し、それがLa3+によるCa2+シグナルの抑制によって低下することが明らかになった。これらの結果から、SF2細胞のマイグレーションやDPSCの遺伝子発現におけるCa2+応答の関与が明らかになった。

This study aims to clarify the role of Ca2+ in the development process of teeth. Cell differentiation is important in the development process, cell proliferation, and morphology. In this study, we established a system for the development of Ca2 +-dependent, long-term photo-dependent cells between primary epithelial cells (SF2) and secondary stem cells (DPSC). This is the first time that SF2 cells and DPSCs have been used in this study. SF2 cells were analyzed quantitatively, and activated Ca2 + influx mechanisms were inhibited. The expression of Ca2+ in SF2 cells is very important. The Ca2 +-mediated response of SF2 cells to P2Y receptors was analyzed. A study on the possibility of Ca2 + release from the plasma The co-culture of SF2 and DPSC increases the Ca2+ content of DPSC. The Ca2 + ions in the DPSC are absorbed by the host cell. In addition to the above, the contents of DPSC can also be determined by the factor of Ca2 +. The results of PCR analysis and RT-PCR showed that the expression of TGFβ3 gene in DPSC increased and the inhibition of La3 + and Ca2 + decreased. The results showed that SF2 cells had higher Ca2 + content than DPSC cells.

项目成果

歯原性上皮細胞株と歯髄幹細胞の共培養による自発的Ca2+振動の増強

牙源性上皮细胞系和牙髓干细胞共培养增强自发Ca2+​​振荡

• 发表时间: 2020
• 作者: 石田成美;村田佳織;谷村明彦
• 通讯作者: 谷村明彦

歯原生上皮細胞のマイグレーションと遺伝子発現におけるカルシウム応答の役割

钙反应在牙源性上皮细胞迁移和基因表达中的作用

• 发表时间: 2018
• 作者: 村田佳織;森田貴雄;根津顕弘;齊藤正人;谷村明彦
• 通讯作者: 谷村明彦

歯原性上皮細胞のマイグレーションにおける成長因子とケモカインの相互作用

生长因子和趋化因子在牙源上皮细胞迁移中的相互作用

• 发表时间: 2019
• 期刊: 北海道医療大学歯学雑誌
• 作者: 村田佳織;石田成美;齊藤正人;谷村明彦
• 通讯作者: 谷村明彦

歯原生上皮細胞の分化におけるストア作動性カルシウム流入の役割

钙池操纵的钙内流在牙源性上皮细胞分化中的作用

• 发表时间: 2017
• 作者: 村田佳織;森田貴雄;齊藤正人;谷村明彦
• 通讯作者: 谷村明彦

Role of the store-operated calcium entry on differentiation of dental epithelial cells．

钙库控制的钙进入对牙上皮细胞分化的作用。

• 发表时间: 2018
• 作者: Kaori Murata;Takao Morita;Akihiro Nezu;Masato Saitoh;Akihiko Tanimura.
• 通讯作者: Akihiko Tanimura.