ADAMTS9の機能と分化調節メカニズムについての研究

ADAMTS9的功能及分化调控机制研究

• 批准号: 17K18135
• 负责人: 茂泉 佐和子
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17K18135/
• 关键词: C.elegans; ADAMTS9; IP3R; IP3; 小胞体; 蛋白質輸送; 分化; 糖尿病

ADAMTS9の発現抑制により、ER-Golgi間の蛋白質輸送が阻害されること、この機能はC末端にあるGONドメインが重要であることを見いだした(2012年. 発表済み)。 細胞内におけるADAMTS9/GON-1の作用点を解明するため、KillerRedを融合したGONドメインをHEK293細胞のゲノムに単コピーで挿入した細胞株を作成した。この細胞に緑色光を照射し、GONドメインが失活した直後に起こる細胞の変化を検討した。その結果、GONドメインが失活した直後に、細胞質のカルシウムイオン濃度が上昇することが明らかになった。また、C.elegansを用いた実験により、細胞質のカルシウムイオン濃度は、IP3受容体を介して、ERからCa2+が流出するためと判明した。さらに、GONドメインを過剰発現させることにより、IP3刺激後の細胞質におけるCa2+濃度の上昇が抑制されることを見いだした。GONドメインはIP3Rの機能を調節し、細胞内Ca2+の調節に関わっていると考え、IP3R関連因子のうち、GONドメインと直接結合する因子があるか否かを免疫沈降法により探索し該当する因子を見いだした。ADAMTS9/GON-1の発現を抑制することにより、細胞内輸送に異常が見られることから、細胞内輸送に関わる因子、RSD-3またはEPN-1、との関係を検討したが、どちらの分子とも遺伝学的な相互作用は認められなかった。細胞内のカルシウムイオン調節不良は、ミトコンドリアの機能調節を介し、細胞老化・細胞死に繋がることが知られているため、C.elegansを用いて、ミトコンドリアの機能を維持することができる薬剤があるか否かを検討した。その結果、FBXをC.elegansに投与するとミトコンドリアの劣化を抑制することができることを見出した。(2022年. 発表済み)。

ADAMTS9 is inhibited by its development, and protein transport between ER-Golgi is inhibited, and its function is important in the C-terminal region (2012). (See below for details). The site of action of ADAMTS9/GON-1 in HEK293 cells was identified and KillerRed was fused. The cells were irradiated with green light, and the GON cells were inactivated immediately after irradiation. As a result, the GON protein was inactivated immediately, and the cytoplasmic protein concentration increased. C.elegans is used to determine the concentration of cytosol, IP3 receptor and ER Ca2 + efflux. The increase of cytoplasmic Ca2 + concentration after IP3 stimulation was inhibited. The function of GON is regulated by IP3R, the regulation of intracellular Ca2 + is studied, the IP3R related factors are detected, the GON related factors are directly combined with IP3R, and the factors are explored by immunoprecipitation method. ADAMTS9/GON-1 production inhibition, intracellular transport abnormalities, intracellular transport factors, RSD-3, EPN-1, reverse relationship, molecular genetic interactions The function regulation of cell apoptosis, cell aging and cell death is discussed in this paper. As a result, FBX C.elegans has been shown to inhibit degradation. (2022 years. (See below for details).

项目成果

老化防止剤、寿命延長剤又はαシヌクレイン毒性軽減剤

抗衰老剂、寿命延长剂或α-突触核蛋白毒性降低剂

• 发表时间: 2021

GOP-1 promotes apoptotic cell degradation by activating the small GTPase Rab2 in C. elegans.

• DOI: 10.1083/jcb.201610001
• 发表时间: 2017-06-05
• 期刊: The Journal of cell biology
• 作者: Yin J;Huang Y;Guo P;Hu S;Yoshina S;Xuan N;Gan Q;Mitani S;Yang C;Wang X
• 通讯作者: Wang X

Analysis of Molecular and Cellular Roles of the GON domain in ER-to-Golgi transport

GON 结构域在 ER 至高尔基体运输中的分子和细胞作用分析

• 发表时间: 2019
• 作者: Sawako Yoshina;Shohei Mitani
• 通讯作者: Shohei Mitani

Cysteine protease cathepsin B mediates radiation-induced bystander effects.

• DOI: 10.1038/nature23284
• 发表时间: 2017-07-27
• 期刊: Nature
• 影响因子: 64.8
• 作者: Peng Y;Zhang M;Zheng L;Liang Q;Li H;Chen JT;Guo H;Yoshina S;Chen YZ;Zhao X;Wu X;Liu B;Mitani S;Yu JS;Xue D
• 通讯作者: Xue D

The role of the GON Domain on IP3R and calcium homeostasis

GON 结构域对 IP3R 和钙稳态的作用

• 发表时间: 2021
• 作者: Sawako Yoshina;Shohei Mitani
• 通讯作者: Shohei Mitani