ADAMTS9の機能と分化調節メカニズムについての研究

点击翻译按钮获取中文摘要

ADAMTS9の発現抑制により、ER-Golgi間の蛋白質輸送が阻害されること、この機能はC末端にあるGONドメインが重要であることを見いだした(2012年. 発表済み)。 細胞内におけるADAMTS9/GON-1の作用点を解明するため、KillerRedを融合したGONドメインをHEK293細胞のゲノムに単コピーで挿入した細胞株を作成した。この細胞に緑色光を照射し、GONドメインが失活した直後に起こる細胞の変化を検討した。その結果、GONドメインが失活した直後に、細胞質のカルシウムイオン濃度が上昇することが明らかになった。また、C.elegansを用いた実験により、細胞質のカルシウムイオン濃度は、IP3受容体を介して、ERからCa2+が流出するためと判明した。さらに、GONドメインを過剰発現させることにより、IP3刺激後の細胞質におけるCa2+濃度の上昇が抑制されることを見いだした。GONドメインはIP3Rの機能を調節し、細胞内Ca2+の調節に関わっていると考え、IP3R関連因子のうち、GONドメインと直接結合する因子があるか否かを免疫沈降法により探索し該当する因子を見いだした。ADAMTS9/GON-1の発現を抑制することにより、細胞内輸送に異常が見られることから、細胞内輸送に関わる因子、RSD-3またはEPN-1、との関係を検討したが、どちらの分子とも遺伝学的な相互作用は認められなかった。細胞内のカルシウムイオン調節不良は、ミトコンドリアの機能調節を介し、細胞老化・細胞死に繋がることが知られているため、C.elegansを用いて、ミトコンドリアの機能を維持することができる薬剤があるか否かを検討した。その結果、FBXをC.elegansに投与するとミトコンドリアの劣化を抑制することができることを見出した。(2022年. 発表済み)。