メタボローム手法を用いた浸潤性大腸がん細胞のバイオマーカー探索

使用代谢组学方法寻找侵袭性结直肠癌细胞的生物标志物

• 批准号: 26860113
• 负责人: 川島 知憲
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26860113/
• 关键词: メタボローム; 大腸がん; CE-TOFMS; 浸潤能; イオン性代謝物

申請者の研究成果は、浸潤性の異なる大腸がん細胞株の代謝物をCE-TOFMSを用いて測定を行い、浸潤性に関与する代謝物の検討を行った。用いた大腸がんの細胞株としてHCT116とDLD1を用いた。この2つの細胞株の浸潤能は、HCT116に比べてDLD1の方が約10倍高いことが報告されている。代謝物の測定は、CE-TOFMSによるメタボローム手法を用いた。大腸がん細胞株に内部標準物質を含むメタノールと水を添加して代謝物の抽出を行い、遠心分離機によるタンパク質の限外ろ過と、遠心エバポレーターによる代謝物の濃縮を経て、CE-TOFMSによるイオン性の代謝物の測定を行った。得られた結果はMasterHANDSの代謝物標準リストを用いてピークを同定した。同定後に、代謝物のピークエリア値を求め、内部標準物質と細胞数で補正をしたピークエリア比を用いて大腸がん細胞株の代謝物の比較を行った。HCT116とDLD1を比較すると、HCT116に比べてDLD1に含まれる代謝物が10倍以上多い代謝物として、アラニン、オルニチンが得られた。一方で、HCT116に比べてDLD1に含まれる代謝物が10倍以上少ない代謝物としてN,N-ジメチルグリシン、N-アセチルプトレスシン、ロイシン、ヒポキサンチン、4-グアニジノ酪酸、N-アセチルヒスチジン、オクトピン、グリセロフォスファチジルコリンが得られた。これらの中でも、N,N-ジメチルグリシン、ヒポキサンチン、4-グアニジノ酪酸、N-アセチルヒスチジンはDLD1では検出されなかった代謝物であった。したがって、大腸がんの浸潤性の違いに大きく関与すると予想される代謝物として10種類得られた。その中でもN,N-ジメチルグリシン、ヒポキサンチン、4-グアニジノ酪酸、N-アセチルヒスチジンの4種類の代謝物はDLD1の高い浸潤性に大きく関与している可能性があることがわかった。

The results of the research, the CE-TOFMS of the cell line of the impregnated plant, the impregnated substance and the substitute of the cell line were measured by the applicant. The cell line was HCT116 and DLD1 was used. The impregnation capacity and HCT116 of the cell line from the second cell line were about 10 times higher than those from the DLD1 square. The substitute material is measured, and the CE-TOFMS device is used to determine the accuracy of the device. The internal standard material of the cell strain contains the standard material of the cell strain of the plant, which contains the standard material of the cell strain, the water supply, the addition of the drug, the extraction of the product, the concentration of the device, the limit of the limit, the concentration of the product, the product of the cell, the product of the cell line, the product of the cell line, the cell line, the cell line, The results show that the standard of MasterHANDS substitute is the same as that of the standard. After the same determination, the cell number of the internal standard is correct, and the cell number of the cell line is compared with that of the cell line. The content of HCT116 DLD1 is 10 times higher than that of DLD1, and that of DLD1 contains more than 10 times. The content of HCT116 is 10 times less than that of traditional DLD1, which is 10 times less than that of traditional Chinese medicine. In this article, the author points out that there are three kinds of things in the world, namely, the Chinese medicine, the mother mother, the mother, the mother, the There are 10 kinds of products that you would like to buy in the first place. In the market, there are some substitutes, such as DLD1, butyrate, butyric acid, butyri