還元型ガレクチン1を用いた上位運動神経変性モデルの樹立とその変性機序の解明

还原型半乳糖凝集素1上运动神经元变性模型的建立及其变性机制的阐明

基本信息

批准号：
26860667
负责人：
藤木亮輔
金额：
$ 2.41万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

以下に、H26度末中間報告時点で立て直したH27年度研究計画の項目別達成内容を記す。【1.GFP発現あるいは非発現神経幹細胞のストック作り】H26年度末～H27年度にかけて行った複数回のGFP発現あるいは非発現神経幹細胞のストック作りにおいて、原因は不明でしたが、新たに作製したストックの収量と質が急激に悪化しました。良質の神経幹細胞を用いることが大前提の研究ですので、状況改善と必要量の良質な細胞の獲得のために1行程で1か月かかる作製工程を複数回行った結果大幅な時間のロスを強いられました。結局その原因ははっきりしませんでしたが、様々な試行錯誤を加えたことで今まで同様とまではいきませんでしたが、徐々に収量と質は改善してきました。【2.還元型ガレクチン1（rGal-1）を用いた変性モデルの樹立】GFP非発現神経幹細胞単独培養下の評価でrGal-1の有意な細胞死誘導作用までは確認できました。一方、神経突起評価にはGFP発現と非発現神経幹細胞の共培養（混合比=1：24～36）が必須ですが、上記ストックの収量と質の悪化が原因で良質な細胞ストックが不足し、残念ながらrGal-1の有意な神経変性作用の証明までは到達できませんでした。【3.rGal-1神経変性作用の下流シグナルの同定、4.rGal-1神経変性作用により発現が大きく変化する因子の網羅的探索、5.候補因子の絞り込みと神経変性におけるkey playerの同定】計画3-5に関しては、計画2が完遂できておらず、自己都合も加わって未着手のまま本研究計画は中途廃案となりました。なお、本研究自体は他の教室員が引き続き継続する予定ですが、扱いに熟練を要する本系の性質上、引継ぎに2-3か月かかりました。以上より、H27年度研究計画は、残念ながら大部分が達成できず、学会発表や論文発表に値する重要性の高い知見を得るまでに至りませんでした。

以下是2005年研究计划的成就的细节，该计划是在2004年部门结束时通过项目重建的。 [1。表达GFP或非表达神经干细胞的库存是导致表达GFP表达GFP或非表达神经干细胞多次在2004年底至2005年之间进行多次进行的，但新生产的股票的产量和质量急剧恶化。这是一个使用高质量神经干细胞的研究项目，因此我们执行了多个生产步骤，一个月在一个笔划中花费了一个月来改善情况并获得所需的高质量细胞，从而导致时间损失很大。最后，原因尚不清楚，但是由于各种反复试验，产量和质量逐渐提高。 [2。使用降低的乳糖素1（RGAL-1）进行评估，在无GFP无GFP神经干细胞下建立了变性模型，证实了RGAL-1的显着细胞死亡诱导效应。另一方面，GFP表达和非表达神经干细胞的共培养（混合比= 1：24-36）对于神经突评估是必不可少的，但是由于上述储备的产量和质量的恶化，我们无法达到我们无法达到RGAL-1的明显神经性效应的地步。 [3。识别RGAL-1神经退行性动作的下游信号，4。全面搜索因RGAL-1神经退行性动作而发生巨大变化的因素，5。缩小候选因素并确定计划3-5的神经变性范围]关于计划3-5，计划2没有完成，并且由于个人原因，这一研究计划是在该过程中逐步进行的。尽管这项研究本身将继续由其他教室成员继续进行，但由于该系统的性质（需要处理技巧），但要转移花费2-3个月。基于上述，不幸的是，无法实现2005财政年度的大多数研究计划，而且我们尚未获得值得在会议或论文中演讲的非常重要的知识。