ES/iPS細胞由来網膜神経組織の移植による視機能再生の機能解析

ES/iPS细胞源性视网膜神经组织移植视功能再生的功能分析

基本信息

  • 批准号:
    26861478
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.41万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2014
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2014-04-01 至 2016-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究では、マウスES/iPS細胞から分化誘導した網膜神経組織を網膜変性モデルマウスの網膜下に移植した後、移植による新たな神経回路形成および変性網膜の光応答回復を電気生理学的手法・カルシウムイメージングによって詳細に機能解析することを目的とした。先行研究により、移植後の網膜片は網膜下において形態的成熟、特異的分子マーカーの発現およびホスト網膜とのシナプス再形成が起こることが示されている。一方、機能的な成熟に関しては、一般的な解析手法であるERGでは検出感度に限界があるため、より高感度な多点電極アレイ(MEA)により電気生理学的解析を行なった。その結果、移植された視細胞由来と考えられるa-waveが検出され、マウスES/iPS細胞由来の移植網膜細胞は機能的にも成熟していると考えられる。また、白色LEDによる光刺激によって移植部直下の網膜神経節細胞から光応答が計測され、変性網膜に見られる神経節細胞の異常発火が抑制されていたことから、移植による光応答の回復および神経保護効果が示唆された。さらに、網膜移植による光応答の回復をハイスループットに検出するため、多光子顕微鏡によるカルシウムイメージング用セットアップを立ち上げ、イメージング用に網膜神経節細胞特異的にGCaMP3を発現する網膜変性マウス(rd1、rd10)を作成した。今後、これらのマウスをレシピエントとして網膜移植を行い、光応答機能の回復をさらに解析する予定である。
In this study, ES/iPS cell differentiation guided the organization of the network sex network. After the transplantation of the subnetwork, the new mental loops were transplanted to form a sensitive network photoluminescence response to the techniques of computer physiology. First of all, we will study the maturity of the configuration of the network under the network after transplantation, and the special molecular analysis will enable us to realize that the network topology will not change and then we will form a real-time display network. On the one hand, the mature device of the machine, the general analytical method, the ERG sensitivity, the limit of sensitivity, the high sensitivity, the multi-electrode detector (MEA), the analysis of computer physiology. The result of the experiment, the origin of the transplant cell, the origin of the a-wave cell, the origin of the ES/iPS cell, and the mature cell function of the transplant network. The white LED light stimulation device transplant part directly under the network god cell light response program, the sexual network network sensor cell system is often used to suppress the temperature response, and the transplant light response response is to instigate the effect of God's protection. The application, network transplant, response, response In the future, you will be able to respond to the network migration line, and the optical answering machine will be able to analyze the prediction.

项目成果

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