2型糖尿病治療薬メトホルミン塩酸塩の口腔癌における骨浸潤・骨破壊に与える影響

2型糖尿病治疗药物盐酸二甲双胍对口腔癌骨侵袭和骨破坏的影响

• 批准号: 26861721
• 负责人: 栗尾 奈愛
• 金额: $ 2.41万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26861721/
• 关键词: メトホルミン塩酸塩; ＩＧＦ－１Ｒ; ＡＭＰＫ; 口腔癌; オートファジー

2型糖尿病治療薬, メトホルミン塩酸塩(Met)の内服患者は発癌率が有意に低く,その抗腫瘍効果に着目した。この機構にはAMP 活性化プロテインキナーゼ(AMPK)が重要で, PI3K/Akt/mTOR シグナル伝達系の mTORの阻害による抗腫瘍効果が報告されている。口腔癌の骨浸潤における腫瘍増殖は破骨細胞性骨吸収により遊離したIGF-1等が腫瘍を活性化する。骨浸潤した癌に対しては抗癌剤療法 が奏功しにくく, 骨微小環境下での癌細胞を制御するメカニズムの解明が重要課題である。IGF-1はmTOR経路を活性化し口腔癌の増殖に関与するとされ, AMPK の活性化作用を持つMetを用いてAMPK を標的とした口腔癌の制御機構の解析を計画した。口腔癌切除標本で癌細胞にIGF-1, mTORの高発現を認めた。口腔癌細胞の移植モデルではMet投与群で腫瘍増殖の抑制を認め，投与群の腫瘍組織ではTunel陽性細胞数の増加とPCNA陽性細胞の減少を認めた。口腔癌細胞株SASによるin vitroの検討ではWB法でSASのAMPKのリン酸化はIGF-1添加により抑制, mTOR等のリン酸化は促進された。Met投与群ではIGF-1添加後のAMPKのリン酸化を抑制せず促進した。MTTアッセイでIGF-1添加によりSASの細胞増殖は促進, Met濃度依存的に抑制された。Met投与群で有意なTunel陽性細胞の増加を認め, SASのアポトーシスへの誘導が示唆されたが, WB法によるcleaved Caspase-3の発現は認めず，異なる機序による増殖抑制効果を考え，LC3による免疫蛍光染色を行った。Met投与群においてLC3の発現を認め, SASへのオートファジー誘導が示唆された。

Type 2 diabetes treatment drugs, such as vitamin D (Met) in patients with oral cancer rate is significantly lower, and anti-tumor effect is also significant. This mechanism is important for AMP activation, and PI3K/Akt/mTOR is important for mTOR inhibition in AMP activation systems. Bone invasion of oral cancer, tumor growth, osteoclast bone resorption, free IGF-1 and other tumor activation The prevention and treatment of cancer cells in bone microenvironment is an important topic in the study of anticancer therapy for bone invasion IGF-1 activation of the mTOR pathway is associated with the growth of oral cancer. The high expression of IGF-1, mTOR in oral cancer cells after resection is recognized. The number of Tunel-positive cells increased and PCNA-positive cells decreased in oral cancer tissue. Oral cancer cell line SAS was studied in vitro by WB method. AMPK in SAS was inhibited by IGF-1 addition, and mTOR was promoted by IGF-1 addition. Met and IGF-1 can inhibit the growth of AMPK and promote its secretion. MTT-1 addition promoted cell proliferation of SAS and Met concentration-dependent inhibition. Met and group were used to detect the increase of Tunel positive cells, SAS and Caspase-3 expression was detected by WB method, and LC3 immunostaining was used to detect the inhibition of proliferation. Met cast and group LC3 appeared, SAS cast and group LC 3 appeared.