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細胞調節因子の識別構造

细胞调节因子的识别结构

基本信息

批准号：
62106007
负责人：
由良隆
金额：
$ 7.17万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1985
资助国家：
日本
起止时间：
1985 至 1987
项目状态：
已结题

项目摘要

1.大腸菌熱ショック遺伝子の転写を司るσ因子(σ^<32>)がFプラスミドの複製開始蛋白をコードするrepE遺伝子の転写に直接関与することを見出した. repEプロモーターはrpoD熱ショックプロモーターと塩基配列が似ており, σ^<32>がそれを識別し転写を促すことによってプラスミド複製を制御している(由良).2.φ80C1の切断反応は, 1本〓DNAにRecAを予め結合させておくと大巾に増加する. しかし, その結合の際にATP-γ-Sが存在すると結合は安定であるが, 切断効率は, 存在しない場合の5%に低下する. このことは1本〓DNAに結合したRecAには, 少なくとも2つの異なる型のあることを示唆している(小川).3.リン酸レギュロン遺伝子群の発現は, PhoB蛋白質がプロモーター領域のpho boxと結合して転写を促進すると考えられる. in vivoでpho box依存性を明らかにした. また, PhoB蛋白質中の一個のアミノ酸置換で活性型のみとなる突然変異株を分離した. PhoR蛋白質によるPhoB蛋白質の活性化の機構解明の手掛りとなっている(中田).4.酵母アデニレートシクラーゼ遺伝子の機能領域を明らかにした. . すなわちアデニレートシクラーゼのN端側に減数分裂に関するエフェクターを作用する領域, 次にRAS遺伝子産物と作用する領域, C端側に触媒作用をもつ領域が存在することがわかった(宇野).5.化学合成した, CRP結合配列をプロモーター活性のない種々のDNA断片とつなぎ合せることにより, cAMP-CRPにより転写が活性化されるプロモーターを人工的に構築することに成功した. 得られたプロモーターの構造と性質を明らかにした(饗場).6.大腸菌外膜蛋白質遺伝子ompC, ompF発現における正の調節因子OmpR蛋白質を精製した. 精製OmpRを用いることにより, OmpRの認識しているDNA一次配列をompC, ompFプロモーター上流に同定した. またompF遺伝子におけるOmpR認識部位は, 折れ曲がりDNA構造をとっていることが明らかとなった(水野).

1. The σ factor (σ^ ) of E<32>. coli heat transfer protein is directly related to the transcription of F. coli replication initiation protein. RepE <32>is the most important element in the DNA sequence. RepE is the most important element in DNA sequence. ATP-γ-S is stable when binding, and the cutoff efficiency is 5% lower when binding occurs. 3. The development of a protein subunit, PhoB protein, is promoted by binding to the domain pho box. in vivo <$pho box dependency One of the acid substitutions in PhoB protein resulted in the isolation of the active form. PhoR protein activation mechanism of PhoB protein is clarified (Nakata). 4. Functional domain of yeast protein is clarified. . 5. Chemical synthesis, CRP binding and alignment, DNA fragment binding and alignment cAMP-CRP was activated and artificially constructed. The structure and properties of E. coli outer membrane protein gene ompC, ompF were studied. Refined OmpR is used in the middle of the day, and the understanding of OmpR is in the middle of the day. OmpR recognition site, folding, DNA structure, open and closed (Mizuno).