Structure and Dynamics of Radicals and Radical Pairs in Protein Complexes by 95-GHz and 360-GHz High-field EPR/ENDOR

通过 95 GHz 和 360 GHz 高场 EPR/ENDOR 分析蛋白质复合物中自由基和自由基对的结构和动力学

基本信息

项目摘要

Zur Aufklärung des Zusammenhangs von Struktur, Dynamik und Funktion biologisch wichtiger Proteinkomplexe, z.B. lichtgetriebener Elektronen- und Protonentransfer-Proteine, hat sich die HochfeldEPR/ENDOR-Spektroskopie als Ergänzung zu Röntgen- und LaserUntersuchungsmethoden hervorragend bewährt. Räumliche und elektronische Strukturen sowie die Konformationsdynamik funktioneller Proteinfragmente lassen sich durch spektrale und zeitliche Auflösung der Anisotropie von Zeeman- und Hyperfeinwechselwirkungen bei hohen Magnetfeldern (bis zu 14 T) und Frequenzen (bis zu 360 GHz) erzielen. Die geplanten Aktivitäten konzentrieren sich auf: 1) Weiterentwicklungen der 95-GHz- und 360-GHz-EPR/ENDOR-Spektrometer für zeitaufgelöste Untersuchungen an Proteinen und deren Konformationsfluktuationen; 2) Anwendungen auf ein- und zweifach ortsspezifisch NO.-spinmarkierte Proteine mit dem Ziel, die Polarität der Spinlabel-Umgebung in kanalbildenden Domänen zu bestimmen. Mit der biologischen Funktion einhergehende Konformationsänderungen sollen am Beispiel selektiv spinmarkierter Mutanten der lichtgetriebenen Protonenpumpe Bakteriorrhodopsin und des kanalbildenden Toxins Colicin A studiert werden, um aktuelle Struktur- und Faltungsmodelle zu überprüfen. Die Proteinproben sollen in flüssigen und gefrorenen Lösungen spektroskopiert werden.
Zur Aufklärung des Zusammengangs von Strukur,Dynamik and Funktion Biologisch wichTiger ProteinkComplex,z.B.lichtgetriebener Elektronen-and Protonentry Transfer-Proteine,Hat sich die Hochfield dEPR/Endor-Spektroskopie Als Ergänzung zu Ergänzung zu Röntgen-and LaserUntersuhugsMethoden hervagend Bewährt.Räumliche and Elektronische Strukturen Sowie die konische Sowie die konische Sowie die KonformationsDynamik Fkktioneller ProteInfrastructure gmente Lassen sich endch Spektrale and zeitliche AuflöSong der各向异性von Zeeman-und Hyperfeinweechwirkungen Hohen wechwirkungen Hohen MagnetFeldern(Bis ZU 14 T)and Fquenzen(Bis ZU 360 GHz)erzielen.1)95-GHz-和360-GHz-EPR/Endor-Spektroeter für zeitaufelöste Untersusuhungen an Proteinen und Deren Konzentrieren fluktuationen;2)Anwendungen auf ein-und Zweifach or tstszifisch no.-spmarkierte Proteine MIT Dem ziel,die polarität der Spinbel-Umgebung in kbildenden Domänzen stibmen.MIT der Biologischen Funktion eInhergehende Konformationsänderungen Sollen am Beispiel selektiv Spinmarkierter Mutanten der lichtgetriebenen Protonenumpe Bakterior视紫红质and des Kanbilbilden Toxins Colicin A Studdiert,um Aktuelle Strukur-und FaltongsModel le zuüberprüfen.在弗卢斯根和地球上的蛋白质和L的特殊身份被发现。

项目成果

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