酵母の分泌タンパク質高次構造形成過程に関与する因子の解析

酵母分泌蛋白高级结构形成因素分析

基本信息

  • 批准号:
    08760071
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.64万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1996
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1996 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

我々は、これまで酵母PDIに関する研究を行い、PDIが生育に必須であることを示した。また、ガラクトース依存性PDI変異株を作製し、PDIが分泌タンパク質の立体構造形成に重要な役割を果たしていることを示した。そして、作製した変異株の生育を多コピーで相補する遺伝子(マルチコピーサプレッサー遺伝子)のクローニングを行い、2つの新規遺伝子(MPD1,MPD2)を取得し、その構造を明らかにした。本研究では、Mpd1pとMpd2pの機能および関係を調べた。まず、グルタチオンS-トランスフェラーゼとの融合タンパク質として、大腸菌内で発現させることにより、Mpd1pがPDI活性を持つタンパク質であることを示した。Mpd2pは、融合タンパク質が不溶性となったため、今後検討が必要である。また、Mpd1pおよびMpd2pの活性中心様配列にin vitro mutagenesis法により変異を導入した結果、この領域がPDIの欠損のマルチコピーサプレッサーとして働く為には必須であることが明らかになった。これらより、Mpd1pとMpd2pはPDIと同様な機能を持つタンパク質であり、これらがPDIのかわりをすることによりPDIの欠損を相補することが示唆された。また、遺伝学的関係を知るため、MPD1,MPD2,EUG1遺伝子の三重破壊体酵母を作製したが、生育可能で、顕著な表現形は観察されなかった。今後は、PDI,Mpd1p,Mpd2p,Eug1pの基質特異性の違いや発現の違いを観察することにより、これらタンパク質の生体内における役割を明らかにしていく予定である。
I'm sorry. I'm sorry. The important effect of PDI secretion on the formation of three-dimensional structure In addition, the production of different plants is complementary to each other, and the structure of new genes (MPD1, MPD2) is clear. This study focuses on the functional relationship between Mpd1p and Mpd2p. Mpd1p PDI activity is expressed in E. coli and in E. coli. Mpd2p, fusion, quality, insoluble, future, necessary The active center of Mpd1p and Mpd2p is arranged in vitro mutagenesis method. Mpd1p and Mpd2p have the same function as PDI. The relationship between genetic knowledge, MPD1, MPD2, EUG1 and triple disruption yeast production, fertility potential, and expression are examined. In the future, matrix specificity of PDI, Mpd1p, Mpd2p, Eug1p will be detected in vivo.

项目成果

期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Hiroyuki Tachikawa: "S.cerevisiae. Mpd1p and Mpd2p in Guidebook to Molecular Chaperones and Protein Folding Factors M.-J.Gething ed." Oxford University Press, (1997)
Hiroyuki Tachikawa:“酿酒酵母。分子伴侣和蛋白质折叠因子指南中的 Mpd1p 和 Mpd2p M.-J.Gething 编辑。”
  • DOI:
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    0
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  • 通讯作者:
    舘川 宏之
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2017
  • 期刊:
  • 影响因子:
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