微生物脱硫酵素に関する研究

微生物脱硫酶的研究

• 批准号: 08760086
• 负责人: 大城 隆
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08760086/
• 关键词: ジベンゾチオフェン; 微生物脱硫; 有機硫黄化合物; Rhodococcus属細菌; 難分解性化合物

本申請者は石油中の有機硫黄化合物のモデルとして考えられているジベンゾチオフェン(DBT)を脱硫し、2-ヒドロキシビフェニルを生成する細菌R.erythropolis D-1が生産するDBT脱硫酵素系について研究を行っている。本年度は、DBT脱硫の第一、第二段階であるDBTからDBTスルホンおよびDBTスルホンから2'-ヒドロキシビフェニル2-スルフィン酸への転換を触媒する酵素について精製を行い、その性質を明らかにした。R.erythropolis D-1を唯一の硫黄源としてDBTを含む完全合成培地で培養し、これを超音波破砕し無細胞抽出液を得た.硫安分画(30-60%)後、DEAE-Sepharoseクロマトグラフィーに通すと両活性ともシングルフラクションでは見いだせなくなり、両活性とも2つの画分の存在下で初めて活性を検出できた。それぞれの一方の画分は共通しており、NADHにリンクし、人工電子受容体、dichlorophenolindophenolやcytochrome c、ferricyanideを基質とするreductase活性を有していた。DBT分解活性を有する画分を精製したところ、分子量270kDa、サブユニット分子量は45kDaの電気泳動的に均一な精製酵素標品が得られた。また、DBTスルホン分解活性を有する画分を精製したところ、分子量88kDa、サブユニット分子量50kDaのほぼ均一な精製酵素標品が得られた.両酵素とも金属キレーター、SH阻害剤によって阻害された。DBT分解酵素系はDBT骨格を有する化合物には作用したが、カルバゾール、フルオレンなどには働かなかった。

This applicant is responsible for the study of organic sulfur compounds in petroleum, such as sulfur compounds, sulfur compounds, sulfur In the first and second stages of the DBT Desulfurization campaign, the first and the second stages of the DBT Desulfurization process, the first and second stages of the desulfurization process, the first and second stages of the DBT Desulfurization process, the first and second stages of the DBT Desulfurization process, the first and second stages of the Desulfurization and Desulfurization process this year, the first and second stages of the Desulfurization and Desulfurization process. R.erythropolis Dmurl 1 "unique sulfur source"DBT" contains "complete synthesis of pedipine", "ultrasonic disruption" and "cell extract". After the thioampere was drawn (30-60%), the DEAE-Sepharose was used to measure the activity of the sample. One side of the company will share the same information as NADH, dichlorophenolindophenol, cytochrome, ferricyanide, and so on. There are significant differences between them. The activity of DBT decomposition was determined by molecular weight, molecular weight, molecular weight and molecular weight of DBT. The decomposition activity of DBT was determined by the determination of molecular weight, molecular weight and activity. Enzyme, metal, metal, SH, enzyme, metal, metal, enzyme, enzyme, The DBT decomposing enzyme system "DBT bone lattice" has the function of chemical compounds, such as the action of the compound, the action of the compound.

项目成果

Takashi Ohshiro: "Dibenzothiophene(DBT)Degrading Enzyme Responsible for the First Step of DBT Desulfurization by Bhodococcus erythropolis D-1-Purification and Characterization" Journal of Fermentation and Bioengineering. 83. 233-237 (1997)

Takashi Ohshiro：“红平红球菌 D-1 负责 DBT 脱硫第一步的二苯并噻吩 (DBT) 降解酶 - 纯化和表征”发酵与生物工程杂志。

Takashi Ohshiro: "Desulfurization of Dibenzothiophene derivatives by Whole Cells of Rhodococcus erythropolis H-2" FEMS Microbiology Letters. 142. 65-70 (1996)

Takashi Ohshiro：“红平红球菌 H-2 全细胞对二苯并噻吩衍生物的脱硫”FEMS 微生物学快报。