精子形成におけるPGP9.5の役割に関する研究

PGP9.5在精子发生中的作用研究

• 批准号: 08770009
• 负责人: 徳永 義光
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Shiga University of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08770009/
• 关键词: PGP9.5; 精子形成; 免疫組織化学; 不妊症; 霊長類; 電子顕微鏡

本年度、霊長類精子形成の律速段階である精祖細胞の調節にPGP9.5が深く関わっていることを明らかにした。動物はニホンザル(Macaca fuscata)を用い、免疫組織化学とコンピューターによる定量解析を行った。PGP9.5免疫反応性は未分化型精祖細胞にのみ認められ、細胞増殖能の指標となるPCNAとの二重免疫染色の結果からPGP9.5陽性細胞は細胞周期のG0期にあることが分かった。PGP9.5はユビキチンC末端水解酵素活性を持つことが報告されていて、ユビキチンを介するextra-lysozomal protein degradationの調節に関与する。そこで私が本年度開発し、既に報告した新しい免疫電顕法を用いてPGP9.5の細胞内局在を検討した。その結果精祖細胞内におけるPGP9.5は細胞質基質に存在し、ユビキチン系調節に関与していることを裏付けた。さらに細胞周期の違いによってPGP9.5の細胞内局在が大きく変化することも明らかに出来た。G0期にある精祖細胞は細胞質に多量にPGP9.5を含む。それに対してS期以降の細胞はそのPGP9.5が核内に局在するようになる。このように細胞内を移動して様々な機能に関与する分子はほとんどが細胞内骨格線維上に存在しているので、その移動は細胞内イオン濃度に依存していると考えられる。そこでカリウムイオンチャンネルに着目し、予備的実験として中枢神経系においてその免疫電顕を行い発表した。

This year, the regulation of PGP9.5 in spermatozoa formation is very important. The quantitative analysis of the protein in animal tissues by immunohistochemistry PGP9.5 immunoreactive cells were found to be undifferentiated spermatozoa progenitor cells and to be able to proliferate. The results of double immunostaining showed that PGP9.5 positive cells were found to be undifferentiated spermatozoa progenitor cells. PGP9.5 is involved in the regulation of extra-lysosomal protein degradation through the regulation of C-terminal hydrolytic enzyme activity. This year's development of new immunoassays for the detection of PGP9.5 in cells was reported. PGP9.5 is related to the regulation of cytoplasmic matrix in spermatozoa. The cell cycle is regulated by PGP9.5, and the intracellular structure is regulated by PGP9.5. G0 stage of sperm progenitor cells, cytoplasm, a large amount of PGP9.5. PGP9.5 is a nuclear protein that is present in cells that are in the S phase. The cellular mobility of these molecules is functionally dependent on the cellular bone density. The immune response of the central nervous system was detected by the immune response of the central nervous system.

项目成果

K.Morishige,Y.Tokunaga et al: "G protein-gated K^+ channel(GIRK1)protein is expressed presynaptically in the paraventricular nucleus of the hypothalamus." BBRC.220. 300-305 (1996)

K.Morishige,Y.Tokunaga等人：“G蛋白门控K^通道(GIRK1)蛋白在下丘脑的室旁核突触前表达。”

Y.Tokunaga et al: "An improved method for pre-embedding immunoelectron microscopy using TritonX-100 combined with reduced osmium and platinous diaminobenzidine." Acta Histochem.Cytochem.29(supplement). 597-580 (1996)

Y.Tokunaga 等人：“一种使用 TritonX-100 与还原锇和铂二氨基联苯胺相结合的预包埋免疫电子显微镜的改进方法。”

Y.Tokunaga et al: "Recent advances in microscopy of cells,tissues and organs." Kluwer Academic Publishers,Boston, 600 (1997)

Y.Tokunaga 等人：“细胞、组织和器官显微镜的最新进展。”