Enantioselective capillary-GC and isotope ratio mass spectrometry, efficient analytical methods in biogenesis studies and clinical biochemistry

Genetisch determinierte Enantioselektivität und/oder Isotopendiskriminierung während der Aromastoff-Biosynthese können heute sehr erfolgreich als“endogene”Echtheitsparameter für natürliche Duft- und Aromastoffe herangezogen韦尔登.Enantioselektive multidimensional Kapillargaschromatographie/Massenspektrometrie（enantio-MDGC/MS）bzw. - 同位素质谱法（对映体-MDGC/IRMS）是在线测定复杂自然基质中Spurenkomponenten含量的最有效方法。对映体-MDGC/MS法也可用于测定。在法兰克福大学幼儿园的第二次合作中（AK教授Böhles）是一个创始人，为的是提供幼儿保育服务（geruchsaktive Verbgg.），Glutar-Azidurie（Type I）sowie für die Verbindungen 3-Hydroxy-2-Methylbuttersäure und 2-Methylcitronensäure，die als Schlüsselverbindungen verbindungen verbindener Azidosen einzustufen sind，（stereo）selektive analytische Methoden für die klinische Diagnostik zu erarbeiten.Diese Verfahren sollen nun auch verstärkt zu Biosynthese-genutzt韦尔登。本文介绍了韦尔登稳定同位素标记（13 C，2 H）和（对映体）-GC/IRMS分析法用于生物合成研究的芳香族化合物分析方法。1-脱氧-D-木酮糖（DOC）溶液可韦尔登，可提高异戊烯基二磷酸盐（IPP）在醋酸/甲羟戊酸盐溶液中的浓度（在细胞质中）和/或优于替代品DOXP-Weg（“Rohmer-Pathway”）in den Plastiden verläuft;在这个时代，ob es zwischen beiden IPP-池（或在Ebene和Prenyldiphosphate上）一个新的Austausch geben kann.Die Aufklärung dieser insgesamt längerfristig angelegten Zielsetzungen wird im Rahmen dieses Vorhabens auf eine begrenzte Anzahl monotenoider Verbindungen von Duft-和Gewürzpflanzen fokussiert。这是一个很好的方法，生物合成的MDGC-（IRMS）的对映体可以通过韦尔登和13 C（2 H）-NMR光谱的对比来确定，并且可以通过色谱的自显影来确定。本文通过对人的体外生物合成的临床生物化学方法的研究，采用MDGC-IRMS-分析韦尔登：2 H-markierte a-Linolensäure（18：3，w-3）u. a. Precursoren sollen an isolierten Placentazellen auf ihre Befähigung zur Biosynthese langkettiger，mehrfach ungesättigter Fettsäuren（LCP），z. B。Docosahexaensäure（22：6，w-3）hin untersucht韦尔登. Diese Frage kommt grundsätzliche Bedeutung zu，sowohl im Hinblick auf optimalen LCP-Versorgungsstatus des Föten als auch bezüglich Minimierung der Risikofaktoren für oxidativen Streptocan der Plazenta.

Genetisch determinierte Enantioselektivität und/oder Isotopendiskriminierung während der Aromastoff-Biosynthese können heute sehr erfolgreich als "endogene" Echtheitsparameter für natürliche Duft- und Aromastoffe herangezogen werden.Enantioselektive multidimensionale Kapillargaschromatographie/Massenspektrometrie (enantio-MDGC/MS) bzw. - Isotopenmassenspektrometrie (enantio-MDGC/IRMS) haben sich dabei als höchst effiziente online-Verfahren zur simultanen herkunftsspezifischen Bestimmung von Spurenkomponenten aus komplexer Naturstoffmatrix erwiesen. Enantio-MDGC/MS wurde darüber hinaus bereits auch fachübergreifend erfolgreich eingesetzt. In weiterführender Zusammenarbeit mit der Kinderklinik der Universität Frankfurt (AK Prof. Böhles) ist geplant, für die erblich bedingten Stoffwechselstörungen Ahornsirupkrankheit (geruchsaktive Verbgg.), Glutar-Azidurie (Typ I) sowie für die Verbindungen 3-Hydroxy-2-Methylbuttersäure und 2-Methylcitronensäure, die als Schlüsselverbindungen verschiedener Azidosen einzustufen sind, (stereo) selektive analytische Methoden für die klinische Diagnostik zu erarbeiten.Diese Verfahren sollen nun auch verstärkt zu Biosynthese-Studien genutzt werden. Dazu werden Stabilisotop-Markierung (13C, 2H) und (enantio)-GC/IRMS-Analyse als Methoden der AromastoffAnalytik für Biogenesestudien bei intakten Pflanzen eingesetzt.Durch Fütterungsversuche mit 13C (2H) stellungsspezifisch markierte Glucose bzw. 1-Desoxy-D-xylulose (DOC) soll geklärt werden, inwieweit die Bildung von Isopentenyldiphosphat (IPP) bei höheren Pflanzen über den klassischen Acetat/Mevalonat Weg (im Cytosol) und/oder über den alternativen DOXP-Weg ("Rohmer-Pathway") in den Plastiden verläuft; zur Zeit ist die Frage offen, ob es zwischen beiden IPP-pools (oder auf der Ebene anderer Prenyldiphosphate) einen Austausch geben kann.Die Aufklärung dieser insgesamt längerfristig angelegten Zielsetzungen wird im Rahmen dieses Vorhabens auf eine begrenzte Anzahl monoterpenoider Verbindungen von Duft- und Gewürzpflanzen fokussiert. Es ist zu erwarten, daß (enantio) MDGC-(IRMS) bei Biogenese-Studien sehr erfolgreich eingesetzt werden kann und im Vergleich zu 13C(2H)-NMR spektroskopischen Verfahren aufgrund wesentlich höherer Empfindlichkeit - und in Verbindung mit chromatographischer Selektivität - entscheidende Vorteile bieten wird. Aus dem Bereich der klinischen Biochemie sollen bestimmte Biosyntheseleistungen beim Menschen über in vitroVersuche getestet und mittels MDGC-IRMS-Analyse aufgeklärt werden: 2H-markierte a-Linolensäure (18:3, w-3) u. a. Precursoren sollen an isolierten Placentazellen auf ihre Befähigung zur Biosynthese langkettiger, mehrfach ungesättigter Fettsäuren (LCP), z. B. Docosahexaensäure (22:6, w-3) hin untersucht werden. Diese Frage kommt grundsätzliche Bedeutung zu, sowohl im Hinblick auf optimalen LCP-Versorgungsstatus des Föten als auch bezüglich Minimierung der Risikofaktoren für oxidativen Streß an der Plazenta.