Identifizierung intrazellulärer eukaryontischer Zielproteine von Yersinia enterocolitica Yop-Effektoren

点击翻译按钮获取中文摘要

Die virulenzassoziierten Typ-III-Sekretionssysteme der humanpathogenen Yersinien (Yersinia enterocolitica, Y. pseudotuberculosis, Y. pestis) sowie anderer pathogener Bakterien schleusen über eine molekulare "Spritze" gezielt Effektorproteine in die Wirtszelle ein und beeinflussen dadurch zelluläre Funktionen. Bei den Yersinien wurden bisher sechs Effektorproteine des plasmidkodierten Typ-III-Sekretionssystems gefunden, YopE, YopP/YopJ, YpkA/YopO, YopM, YopT und YopH und ihre Wirkungsweise teilweise charakterisiert. Die spezifischen eukaryontischen Zielproteine der meisten dieser Effektorproteine sind bisher nicht bekannt.In den in diesem Antrag dargestellten Arbeiten sollen mit Hilfe von verschiedenen Methoden zum Nachweis von Protein-Protein-Wechselwirkungen ("Two-Hybrid"-Systeme und anderen Screeningmethoden) aus eukaryontischen Expressionsgenbanken die Interaktionspartner der Y. enterocolitica Yop-Effektorproteine (YopE, YopM, YopP, YopT, YpkA) in Wirtszellen aufgespürt werden. Ausgehend von der Identifizierung entsprechender Zielproteine soll sich eine weitere funktionelle Charakterisierung der Effektorproteine anschließen.Durch mikroskopische Techniken soll in einem zweiten Teilprojekt der geplanten Arbeiten versucht werden, die Struktur des virulenzassoziierten Typ-III-Sekretionsapparat von Y. enterolitica näher zu untersuchen.