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ヤマトヒメミミズをモデルにした体細胞クローン個体作成の試み

尝试以大和姬蚯蚓为模型创建体细胞克隆

基本信息

批准号：
09878168
负责人：
栃内新
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

体節を持つ動物としては劇的に高い再生力を持つヤマトヒメミミズをモデルに、動物においても体細胞を培養してクローン個体が作れるかどうかを検討してきた。最小再生可能断片を知る目的で行った実験から、2体節以上からなる断片は完全な個体にまで再生するが、1体節断片は再生しないことがわかった。自切切断部と体節の隔膜との間にはズレがあるため、1体節断片には連続した完全な体節が含まれないことが再生不能の一因と考えられ、この動物の再生には細胞だけではなく前後方向などを決定する位置情報が必要であることが示唆された。位置情報の乱れとして、本来尾を作るべきところに頭ができるために生じる再生双頭奇形が発見された。この個体が自切すると最初に形成された頭部の後方、つまりもとの個体の前方に位置する切り口からは必ず頭が形成され、新しい頭部には頭尾匂配を形成する活性がないことが推測された。正常断片の再生には腸も参加するが、無腸個体でも再生できる。しかしこの場合、短期間で再生されるのは脳を含む頭部神経節と咽頭を持つ頭部のみであり、正常な尾部は再生されない。さらに、無性個体から生殖細胞を含んだ生殖巣も再生することがわかった。増殖細胞のラベル・追跡実験の結果、生殖細胞となる細胞は再生初期に分裂した後、しばらくの非分裂期を経過した後に生殖巣に侵入し生殖細胞に分化することが示された。様々な動物の生殖細胞系列を特異的に検出することが知られているvasa遺伝子プローブを得ることを目的にPCRを行い2つのクローンを得、そのうち1つは塩基配列からvasa関連遺伝子であることがわかった。本課題研究から、この動物においても体細胞培養クローン作成が容易ではないことが明らかになったので、今後は無性個体断片が有性化再生するときの生殖細胞の起源と、多能性幹細胞としてのネオブラストの研究に重点をシフトさせる。

Somatic cell culture in animals and individuals The purpose of knowing the smallest possible fragment of regeneration is to be carried out in practice, fragments of more than 2 body segments are to be regenerated in complete individuals, and fragments of 1 body segment are to be regenerated. The separation of the body segment from the cutting part is necessary to determine the position information of the cell in the front and back direction of the animal. The position information is confused, the original tail is made, the head is made, the reproduction is made, and the double-headed singular shape is made. The individual is initially formed in the rear of the head, and the individual is positioned in the front of the head, and the individual is formed in the rear of the head. The regeneration of normal fragments and non-gut individuals can be achieved. In this case, the short term regeneration is included in the head section, the throat section, the head section, and the normal tail section. The reproductive cells of asexual individuals include reproductive cells and reproductive cells. The reproductive cells were traced back to the early stages of cell regeneration, after division, after non-division, after reproductive invasion and differentiation. The germ cell series of animals are specific to the detection and detection of the virus. This project focuses on the study of the origin of germ cells and the development of pluripotent stem cells in animal somatic cell culture.