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味覚修飾タンパク質ネオクリンのｐＨ変化に伴う甘味発現機構の解明

阐明与味觉调节蛋白 neoculin pH 变化相关的甜味表达机制

基本信息

批准号：
13J00232
负责人：
小泉太一
金额：
$ 1.15万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J00232/
关键词：
味覚 NMR 甘味受容体甘味タンパク質

项目摘要

【目的】味覚修飾タンパク質ネオクリンがヒト甘味受容体を活性化させる仕組みをしらべた。このタンパク質は中性でほのかな甘味を感じさせる一方で、酸性では強烈な甘味を感じさせるという、ユニークな性質をもつ。ネオクリンがpHに依存して「ほのかに甘い」状態から「甘い」状態へと変化する仕組みを明らかにすることは、甘味受容体による甘味受容機構の解明の一助になると予想している。とりわけネオクリンを含めた甘味タンパク質の受容機構は十分に解明されておらず、その受容機構について新たな知見を獲得して応用することができれば、未知の低カロリー甘味物質の開発への道も拓き得ると考えた。【研究の概要】ネオクリンが甘味受容体を活性化するうえで重要なアミノ酸残基を探索した。以前にNMR法を用いた解析によって、その候補を網羅的にスクリーニングした。今回、これらのアミノ酸残基の役割を変異体解析によって検証した。【方法】計14種類のアミノ酸残基をAlaに置換したネオクリン点変異体を、大腸菌発現系で生産した。その甘味活性をしらべることで、変異を導入したアミノ酸残基が本来担っていた役割を考察した。【結果】１, ネオクリンのpHに依存した「ほのかに甘い」状態から「甘い」状態への変化を制御するアミノ酸残基を、既知の残基も含めて4種類同定した。２, 甘味受容体との親和性決定に寄与するアミノ酸残基を4種類同定した。３, 上記2群のアミノ酸残基はネオクリン分子表面上で立体構造上異なる場所に分布しており、かつ独立に機能を果たすことが示された。以上の結果より、ネオクリン分子上には、pHに依存して甘味強度を調節する「pH感受性領域」と、甘味受容体との結合に重要な「親和性領域」とが存在することが示された。今後、「pH感受性領域」が作用している甘味受容体上の構造領域を解明することによって、新規甘味調節物質の開発にもつながると期待している。

[objective] to make sure that the active body of the receptive body is active, and that the active body is very active. I don't know. I don't know what to do. The state of the pH system is related to the status of the system. The staff of the organization is aware of the situation, and the receptive body is responsible for the information of the acceptor and the recipient. It is very important for the receiving institution to understand that the receiving institution has obtained the information that it has received information from the receiving institution that you have received the information that you have obtained. [summary of the study], "active", "important", "exploration of acid residues". In the past, the NMR method was used to analyze the health status of the host network and the host network. This time, the acid residue was cut and the body was analyzed. [methods] A total of 14 kinds of antifungal acid residues Ala were used to determine the location of bacteria and strains of bacteria. The sweet flavor activity, the acid residue, the acid residue and the acid residue were investigated. [results] 1. It is known that the pH residues are homotypic acid residues, and the known amino acid residues are known to contain the same antigens. 2. Sweetness tolerance and sexual determination are the same as those of acid residue 4. 3. On the surface of the two groups of acid residues, the molecular surface of the two groups of acid residues is distributed on the surface of the molecular surface, and the independent mechanism is used to show the temperature. The above results show that there are significant differences in the molecular structure of pH, the strength of pH, the field of receptivity of pH, the field of tolerance and the field of sex. In the future, the "pH receptivity field" plays an important role in the development of the system on the receptive body, and the new flavor products are expected to be tested.