血中リン調節因子Galnt3、Fgf23遺伝子発現を制御するエンハンサーの同定

控制血磷调节剂 Galnt3 和 Fgf23 基因表达的增强子的鉴定

基本信息

  • 批准号:
    22K11805
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.66万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2022
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2022-04-01 至 2025-03-31
  • 项目状态:
    未结题

项目摘要

この研究では、血中のリン濃度を調節しているホルモンFGF23(遺伝子名Fgf23)と、その活性を維持している酵素GalNAc-T3(遺伝子名Galnt3)の発現が、どのように制御されているかを調べる。FGF23は主に骨から産生され、骨形成に必須の転写因子Runx2を介して発現調節されている可能性がある。また、Runx2が転写調節する遺伝子をマイクロアレイで網羅的に検索した結果、Galnt3がRunx2によって骨芽細胞でも発現誘導された。このとき、Fgf23は骨芽細胞でも強く発現していた。したがって、Galnt3がFGF23の活性を維持する経路で、Runx2がGalnt3の発現を誘導し、血中リン濃度の調節に関与している可能性が考えられた。そこで、Runx2の結合領域を目印にエンハンサーを探索し、in vivo実験によってGalnt3およびFgf23の生理的発現に必要なエンハンサーを決定する。はじめに、9週齢のマウス大腿骨および脛骨から分画した骨芽細胞画分と骨細胞画分を用いて、real-time RT-PCR法により、Runx2とGalnt3およびFgf23の発現を調べた。Runx2とGalnt3は骨芽細胞画分で強く発現しており、Fgf23は骨細胞画分で強く発現していた。つぎに、初代培養したマウス骨芽細胞を用いたRunx2抗体によるChIPシークエンスおよびATACシークエンスによるオープンクロマチン領域検出の結果と、データベース上の種間の塩基配列ホモロジーから、Galnt3のエンハンサー候補を選定した。
In this study, the expression and inhibition of GalNAc-T3(Galnt3) were regulated by FGF23 (Fgf23) and GalNAc-T3(Galnt3). FGF23 is an essential transcription factor for bone formation, Runx2, and the possibility of regulating bone formation is discussed. In addition, Runx2 and Runx2 are regulated by gene expression. Fgf23 is a new type of bone bud cell. The possibility that Galnt3 and FGF23 activity may be maintained in the pathway, that Runx2 and Galnt3 expression may be induced, and that plasma concentrations may be regulated is examined. In vivo, the binding domain of Runx2 is explored and determined as necessary for the physiological development of Galnt3 and Fgf23. The expression of FGF23 was modulated by real-time RT-PCR. Runx2, Galnt3, and Fgf23 are bone bud cells. The results of detection in the field of ChIP and ATAC in the primary culture of bone bud cells using Runx2 antibody were selected.

项目成果

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