アンジオテンシンによる脳血管老化機序の解明と認知症治療への展開

血管紧张素诱导脑血管衰老机制的阐明及其在痴呆治疗中的进展

• 批准号: 22K11829
• 负责人: 閔 莉娟
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K11829/
• 关键词: 脳血管細胞; 脳血管老化; 認知機能; アルツハイマー病; シャペロン介在性オートファジー; LAMP-2A; 認知機能低下; 脳血管老化・保護; アミロイドβ蓄積; オートファジー; レニン・アンジオテンシン系

[目的]　①アンジオテンシン（Ang）II刺激が脳血管細胞を老化させ、認知機能を低下させることを個体レベルで実証する。②AngIIが脳血管老化を促進するメカニズムをシャペロン介在性オートファジー（CMA）に着目して明らかにする。③AngII-CMA-脳血管老化-認知機能低下の関係を明らかにする。[方法] マイクロ浸透圧ポンプでAngIIを脳室内投与したC57BL/6Jマウスからの脳血管とAngII連日刺激した脳血管平滑筋細胞（BVSMC）を用い、老化関連βガラクトシダーゼ(SA-β-gal)染色により脳血管細胞老化を評価した。老化関連因子p53やp16などCDKIの発現、CMA経路関係因子LAMP-2A、Hsc70、Hsp90、CHIPなどの発現はAngII連日刺激したBVSMCのライセ―トを用い、ウェスタンブロッティング法にて測定した。また、LAMP-2Aの老化における役割を明らかにするため、LAMP-2Aのコンストラクトを作製してきた。[結果] AngIIの脳室内投与マウスの脳血管のSA-β-gal染色実験は一回だけ行ったため、明らかに証明できるデータを得なかったが、AngIIで連日刺激によりBVSMCの老化細胞数とp53、p21、p27、p16などCDKIの発現は増加することが認められた。また、BVSMCへのAngII刺激によりCMA経路関係因子の中、LAMP-2Aだけの発現は減少することが認められた。遺伝子LAMP-2A、タグFLAGを含むpcDNA3.1(+)組み換えプラスミドを精製でき、BVSMCにトランスフェクションしてLAMP-2Aの高発現が確認された。これから、得た組み換えプラスミドを用いてLAMP-2Aの老化作用を明らかにする。[結論] AngIIがCDKIを介して脳血管細胞を老化させる可能性が示唆された。そのメカニズムにはCMA経路関係因子であるLAMP-2Aが深く関与している可能性も示唆された。

[目的] 1。在单个水平上证明血管紧张素（ANG）II刺激会导致脑血管细胞的衰老并损害认知功能。 2）通过关注伴侣介导的自噬（CMA），ANGII促进脑血管老化的机制将得到阐明。 ③阐明Angii-CMA，脑血管衰老和认知能力下降之间的关系。方法：每天使用Angii刺激的微型泵和脑血管平滑肌细胞（BVSMC）的室内静脉内静脉内静脉内给予AngII的脑血管，每天都使用脑血管造细胞细胞播种，以评估脑血管造细胞细胞播种。使用BVSMC许可证刺激了每日Angii的CDKI的表达，例如与衰老相关因子p53和p16，以及CMA途径相关因子LAMP-2A，HSC70，HSP90，芯片等的表达。此外，我们还创建了LAMP-2A的结构，以阐明LAMP-2A在衰老中的作用。 [Results] Since SA-β-gal staining experiments of cerebrovascular vascular in mice treated with intraventricular administration of AngII were performed only once, we did not obtain clearly evidence of data, but it was found that daily stimulation with AngII increased the number of senescent cells in BVSMC and the expression of CDKI such as p53, p21, p27, and p16.此外，发现BVSMC的Angii刺激在与CMA途径相关的因子中单独降低了LAMP-2a的表达。可以纯化含有基因LAMP-2a和TAG标志的PCDNA3.1（+）重组质粒，并转染到BVSMC中以确认LAMP-2A的高表达。由此，获得的重组质粒将用于阐明LAMP-2a的衰老效应。 [结论]有人提出，AngII可能会通过CDKI衰老的脑血管细胞。还建议该机制可能涉及LAMP-2A，这是与CMA途径相关的因素，深深参与。

项目成果

愛媛大学大学院医学系研究科 医化学・細胞生物学 研究紹介

爱媛大学医学研究科医学化学/细胞生物学研究介绍